cetrimid agar o cetrimidă este un mediu de cultură solid selectiv, conceput pentru izolarea Pseudomonas aeruginosa. Se bazează pe evidențierea producției de pigmenți caracteristici acestei specii și a fost realizată din modificarea agarului Tech, creat de King, Ward și Raney..
Formula originală conținea săruri de clorură de magneziu, sulfat de potasiu, digestie pancreatică a gelatinei și agar-agar. Modificarea formulei a constat în adăugarea de cetrimidă (bromură de cetil trimetil amoniu) și glicerol.
Agar cetrimid este util pentru studiul microbiologic al probelor în care prezența Pseudomonas aeruginosa. Trebuie remarcat faptul că această bacterie are cea mai mare importanță, deoarece, deși face parte din microbiota normală a mediului, se comportă frecvent ca un agent patogen oportunist..
Prin urmare, una dintre cele mai frecvente probleme cauzate de acest germen sunt infecțiile nosocomiale, adică cele care apar în mediul spitalicesc, atacând pacienții care au un sistem imunitar deprimat.
Pe de altă parte, datorită afinității pe care acest microorganism o are cu umiditatea, cele mai vulnerabile ținte de contaminare sunt: echipamente de respirație asistată, medicamente, nebulizatoare, surse de apă, aparate de aer condiționat, dezinfectanți, soluții cu săpun, soluții injectabile, răni deschise, catetere, tuburi urinare, printre altele.
În acest sens, agar cetrimidă este util pentru a efectua controale microbiologice și culturi pentru elementele menționate anterior..
Indice articol
Agar cetrimid se bazează pe capacitatea mediului de a promova creșterea P. aeruginosa, stimulează producția de pigmenți și inhibă la rândul său creșterea altor microorganisme.
Aceste proprietăți se datorează funcției fiecăreia dintre componentele sale. Peptona gelatină prezentă servește ca sursă de azot, vitamine și minerale. Glicerina sau glicerina funcționează ca sursă de carbon.
La rândul său, cetrimida (bromură de cetil trimetil amoniu) este substanța care inhibă dezvoltarea bacteriilor, altele decât P. aeruginosa, inclusiv alte specii aparținând aceluiași gen.
Inhibarea se produce deoarece cetramida acționează ca un detergent cationic, reușind să destabilizeze membrana plasmatică a majorității bacteriilor, cu excepția P. aeruginosa și alții care reușesc să supraviețuiască.
Pe de altă parte, conține clorură de magneziu și sulfat de potasiu. Acești compuși stimulează expresia fenotipică legată de capacitatea de a Pseudomonas aeruginosa pentru a produce diverși pigmenți, inclusiv: piocianină, pioverdină, piorrubin, piomelanină și fluoresceină. În cele din urmă, conține agar-agar, ceea ce îi conferă consistența solidă.
Interpretarea creșterii obținute în acest agar se realizează după cum urmează:
Observarea coloniilor rotunde, netede, cu margini regulate, cu producție de pigmenți albastru-verzui, verzi, maronii sau roșiatici, plus emisia de miros fructat (aminoacetofenonă), este un rezultat prezumtiv al prezenței acestei bacterii în proba menționată..
Mai mult, este indicativ pentru P. aeruginosa observarea unui pigment galben-verzui strălucitor pe colonii atunci când placa este expusă la lumina ultravioletă.
Trebuie remarcat faptul că fiecare culoare observată se datorează producerii unui anumit pigment. Pigmentul albastru-verde corespunde producției de piocianină, verde la pioverdină, roșiatic la piorrubin, maro la piomelanină și fluorescența galben-verde strălucitor sub lumina UV la fluoresceină..
Se cântăresc 43 g de mediu deshidratat și se dizolvă în apă distilată. Se adaugă 10 ml glicerol. Aduceți amestecul la o sursă de căldură. Se fierbe câteva minute până la dizolvarea completă.
Autoclavă la 121 ° C timp de 15 minute. Lăsați să stea și serviți în vase Petri sterile când temperatura este în jur de 50 ° C.
Lăsați să se solidifice, inversați, comandați în plaqueros și păstrați-l în frigider până la utilizare. Pentru a însămânța plăcile de agar cetrimidă, acestea trebuie scoase din frigider în prealabil și lăsate să se încălzească la temperatura camerei..
PH-ul final al mediului trebuie să fie de 7,2 ± 0,2.
Culoarea mediului deshidratat este bej, iar preparatul este alb opac.
Pe agar cetrimidă, pot fi plantate toate tipurile de probe în care prezența Pseudomonas aeruginosa. Prin urmare, este util în toate domeniile microbiologiei (de mediu, industrial, clinic, de apă și alimente)..
Este de o mare importanță să analizăm mediile spitalicești și astfel să putem aplica măsuri corective, deoarece acest microorganism ajunge la pacienți prin echipamente contaminate, medicamente, soluții și consumabile utilizate de pacient.
În acest fel, microorganismul poate infecta tractul respirator inferior, tractul urinar și rănile pacienților imunosupresați..
Colonia contează de P. aeruginosa în testele de limită microbiană.
Agar cetrimidă poate fi utilizat ca cultură primară. Placa este inoculată pe una dintre marginile ei și de acolo este distribuită prin epuizare către restul plăcii. Probele lichide pot fi însămânțate la suprafață cu o spatulă drigalski.
Plăcile sunt incubate aerob la 37 ° C timp de 24 de ore de incubare.
-Un procent mic de tulpini de Pseudomonas aeruginosas nu produc piocianină, deci un fals negativ poate fi interpretat.
-Unele specii de Pseudomonas importante din punct de vedere clinic sunt inhibate în acest mediu.
-În ciuda respectării caracteristicilor descrise pentru Pseudomonas aeruginosa, acestea trebuie coroborate cu dovezi suplimentare de identificare. Un test care nu trebuie ratat este testul oxidazei, acesta trebuie să dea pozitiv.
-Unele Enterobacteriacee pot crește pe acest mediu și pot dezvolta un pigment galben, dar diferă de Pseudomonas aeruginosa prin aceea că atunci când placa este supusă luminii ultraviolete nu există fluorescență.
-Serratia marcescens reușește să se dezvolte și produce un pigment roz.
-Dacă plăcile însămânțate cu agar de cetrimidă sunt expuse o perioadă de timp la temperatura camerei, tulpinile de P. aeruginosa pot pierde fluorescența observată la lumina UV, însă proprietatea este recuperată dacă este re-incubată la 37 ° C.
Pentru a analiza buna performanță a agarului de cetrimidă, pot fi utilizate tulpini de control, cum ar fi: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 și Staphylococcus aureus ATCC 25923.
Rezultatele așteptate sunt:
Nimeni nu a comentat acest articol încă.