Cary Blair Justificare medie, pregătire și utilizări

1736
David Holt

jumătate Cary Blair este un agar semisolid, utilizat pentru transportul și conservarea probelor biologice care adăpostesc agenți patogeni intestinali, microorganisme labile și anaerobe. Ca orice mijloc de transport, funcția sa este de a menține proba în condiții optime până când este cultivată. Microorganismele patogene prezente, precum și microbiota însoțitoare, trebuie să rămână viabile, dar fără a-și crește populația..

Cary Blair Medium este rezultatul schimbării formulării Stuart Transport Medium. Modificarea a fost efectuată în 1964 și a constat în înlocuirea sistemului de reglare a pH-ului (glicerofosfat) cu un tampon fosfat anorganic..

A. Culturette cu Cary Blair Medium B. Colector de scaune cu Cary Blair Medium. Sursa: A. Video Meganhow, obține o cultură a plăgii 2011 youtube.com B. Utilizator: Mattes [Domeniul public]

Reformularea a fost necesară deoarece creatorii săi au realizat că glicerofosfatul după un anumit timp poate fi metabolizat de unele bacterii saprofite. Acestea se înmulțesc cu agenții patogeni prezenți.

Alte modificări au fost eliminarea albastrului de metilen, precum și reajustarea pH-ului către alcalinitate (pH 8,4). Toate aceste schimbări au îmbunătățit eficiența mijloacelor de transport.

Inițial, mediul Cary Blair a fost utilizat pentru întreținerea agenților patogeni intestinali, cum ar fi Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae și Campylobacter sp.

Cu toate acestea, ulterior s-a văzut eficacitatea în conservarea viabilității microorganismelor patogene solicitante și labile, cum ar fi: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae și unele anaerobe.

Indice articol

  • 1 Justificare
  • 2 Pregătirea
  • 3 Utilizați
    • 3.1 Tipul probelor
    • 3.2 Colectarea probelor
    • 3.3 Identificarea eșantionului
    • 3.4 Transfer
  • 4 Investigații efectuate asupra mijloacelor de transport Cary Blair
  • 5 Controlul calității
  • 6 Referințe

Bază

Mediul Cary Blair conține clorură de sodiu, tioglicolat de sodiu, fosfat disodic, clorură de calciu și agar.

Clorura de sodiu menține echilibrul osmotic al mediului, fosfatul disodic și clorura de calciu echilibrează pH-ul. La rândul său, tioglicolatul de sodiu menține un potențial scăzut de reducere a oxidării, în timp ce porțiunea mică de agar asigură consistența semi-solidă..

Mediul Cary Blair nu conține substanțe nutritive, deoarece funcția unui mediu de transport este de a menține proba fără ca acesta să sufere modificări în ceea ce privește umiditatea și sarcina microbiană; adică evită deshidratarea probei, păstrând în același timp viabilitatea și cantitatea de microorganisme prezente.

În cele din urmă, pH-ul ușor alcalin previne moartea microorganismelor prin aciditate, în special Vibrios sunt foarte sensibili la acizi.

Pregătirea

Cary Blair media este disponibil comercial ca dispozitiv special gata de utilizare. Sistemul de transport este acoperit de o pungă de plastic Peel Pack. În interior conține un tampon pentru colectarea probei și tubul containerului pentru mediul semi-solid al lui Cary Blair..

De asemenea, pe piață există case comerciale care furnizează mediul deshidratat pentru prepararea acestuia în laborator..

Pentru a face acest lucru, cântăriți 13,2 g de mediu deshidratat și dizolvați-l într-un litru de apă distilată. Se încălzește și se agită preparatul până se dizolvă complet. Distribuiți mediul în eprubete cu șurub (Bakelite).

Aburiti tuburile timp de 15 minute. Se lasă să se răcească și se păstrează la temperatura camerei până la utilizare.

Mediul Cary Blair neinoculat poate fi păstrat optim timp de până la 18 luni la temperatura camerei.

PH-ul mediului trebuie ajustat la 8,4 ± 0,2. Culoarea mediului pregătit este bej, cu oarecare opalescență.

Utilizare

Tipul probelor

Cary Blair Medium este utilizat atunci când specimenele de scaun, tampon rectal și tampon vaginal nu pot fi procesate imediat.

Atunci când nu există mijloace de transport disponibile, probele pot fi depozitate la -70 ° C.

Prelevarea de probe

Tamponul este impregnat cu proba și este introdus în mediul Cary Blair, fără a ajunge la fund.

Identificarea probei

Mediul Cary Blair trebuie să aibă o etichetă în care sunt plasate datele de bază, cum ar fi: numele și prenumele pacientului, numărul de identificare al probei, sursa recoltării probei, medicul curant, data și ora recoltării. , diagnostic prezumtiv, tratament cu antibiotice.

Transfer

Strâns acoperit și transportat la temperatura camerei pentru probe fecaleÎntrucât, pentru probele vaginale în căutarea microorganismelor anaerobe, se recomandă transportul probelor la 4 ° C.

În toate cazurile, timpul de transfer recomandat este de 4-6 ore, cu maximum 24 de ore..

Dacă prezența Campylobacter jejuni în probele de scaun și acestea nu pot fi procesate în 24 de ore, se recomandă păstrarea în mediu Cary Blair la 4 ° C.

Cercetări efectuate asupra mijloacelor de transport Cary Blair

Mai multe studii au arătat că mediul Cary Blair poate rămâne viabil pentru microorganismele enteropatogene din genul Shigella și Salmonella timp de până la 49 de zile după prelevarea probei..

La rândul său, Vibrio cholerae, un alt agent patogen intestinal important, este capabil să supraviețuiască timp de 22 de zile, în timp ce Yersinia pestis (agent cauzal al ciumei bubonice și pneumonice) poate fi recuperat după 75 de zile.

Cu toate acestea, în ciuda durabilității demonstrate în ceea ce privește recuperarea acestor microorganisme, se recomandă ca probele prelevate să fie transportate în mediu Cary Blair la laborator cât mai repede posibil..

La fel, odată ce proba ajunge la laborator, trebuie să fie semănată fără întârziere în mediile de cultură respective..

Pe de altă parte, mediul Cary Blair, pe lângă faptul că este util pentru transportul microorganismelor facultative, este recomandat și pentru probele care conțin agenți patogeni anaerobi..

În acest sens, DeMarco și colaboratorii din 2017 au realizat un studiu intitulat: Supraviețuirea microorganismelor vaginale în trei sisteme de transport disponibile comercial.

Ei au demonstrat că mediul de transport Cary Blair este cel mai bun mediu de transport pentru conservarea și recuperarea microorganismelor anaerobe vaginale. De asemenea, au arătat că cea mai mare rată de recuperare a fost atinsă atunci când temperatura de transfer a fost de 4 ° C..

Prin urmare, se concluzionează că temperatura de transport pentru tampoane vaginale (microorganisme anaerobe) ar trebui să fie la 4 ° C. În timp ce pentru probele fecale care caută microorganisme facultative, temperatura ideală este temperatura camerei..

QA

Tulpini cunoscute sub numele de Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis  ATCC 14028, Vibrio cholerae Da Campylobacter sp.

Mediul este inoculat cu tulpina aleasă și menținut la temperatura camerei timp de 24 de ore. Acestea sunt apoi însămânțate în mediile de cultură corespunzătoare. În toate cazurile, se așteaptă o recuperare satisfăcătoare a microorganismului în cauză..

Referințe

  1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN și colab. Supraviețuirea microorganismelor vaginale în trei sisteme de transport disponibile comercial. Anaerob. 2017; 45: 44-49.
  2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Comparația mediilor de conservare pentru depozitarea probelor de scaun. J Clin Microbiol. o mie noua sute nouazeci si cinci; 33 (8): 2176-2178.
  3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Comparația mediilor de conservare și a condițiilor de îngheț pentru depozitarea exemplarelor de fecale. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosticul microbiologic. A 5-a ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosticul microbiologic Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.
  6. Laboratoarele Conda Pronadisa. Jumătate Cary Blair. Disponibil la: condalab.com
  7. Laboratorul Metrix. Cary Blair. Disponibil la: metrixlab.mx

Nimeni nu a comentat acest articol încă.