Agar Salmonella-Shigella cunoscut și sub denumirea de agar SS, este un mediu moderat selectiv și diferențial, special conceput pentru izolarea bacteriilor enteropatogene din genurile Salmonella și Shigella, atât din probe de mediu, cât și din probe clinice..
Agar SS are o compoziție complexă; Este alcătuit din extract de carne, peptonă, lactoză, săruri biliare, citrat de sodiu, tiosulfat de sodiu, citrat feric, agar, roșu neutru, verde strălucitor și apă distilată. Având în vedere selectivitatea sa mare, pot fi semănate probe cu floră mixtă abundentă..
În laboratoarele de microbiologie, mediul Salmonella-Shigella este utilizat pe scară largă pentru a investiga prezența Salmonella și Shigella în probe diareice de scaun, ape uzate, apă potabilă și alimente..
Uneori este necesar să se utilizeze bulion de pre-îmbogățire (bulion de lactoză) și bulion de îmbogățire (bulion de selenită cistină) pentru recuperarea tulpinilor de Salmonella.
Acești pași sunt necesari atunci când se suspectează existența Salmonella într-o cantitate foarte mică sau în cazul în care tulpina poate fi abuzată de procesele de producție industrială, în principal alimentele procesate. De asemenea, se recomandă îmbogățirea probelor de scaun de la pacienții care au fost tratați cu antibiotice..
Ulterior, bulionul îmbogățit poate fi însămânțat pe agar Salmonella-Shigella și alte medii similare, cum ar fi agar xiloză, lizoxi deoxicolat (XLD) și agar enteric Hektoen (HE)..
Indice articol
Fiecare componentă a mediului de cultură Salmonella-Shigella are o funcție specifică, iar amestecul în ansamblu îi conferă proprietățile care îl caracterizează..
Extractul de carne și peptona (digerate cu cazeină și țesut animal) furnizează substanțele nutritive necesare (azot, carbon și vitamine) pentru dezvoltarea microorganismelor capabile să tolereze restul componentelor..
Agar-agar este însărcinat cu asigurarea consistenței solide mediului.
Acest mediu este extrem de selectiv deoarece conține săruri biliare, citrat de sodiu și verde strălucitor. Prin urmare, inhibă creșterea tuturor bacteriilor Gram pozitive și a majorității bacililor Gram negativi, inclusiv a unor coliformi..
În timp ce bacteriile din genul Salmonella și unele tulpini de Shigella susțin acești compuși.
În principal, genul Salmonella este foarte rezistent la sărurile biliare, atât de mult încât sunt capabile să trăiască în vezica biliară a unor pacienți purtători care aruncă în mod constant bacteriile din scaunele lor..
Lactoza este carbohidratul fermentabil care ajută la diferențierea tulpinilor care fermentează lactoza de cele care nu fermentează. Această proprietate este evidențiată de prezența indicatorului pH, care în acest mediu este roșu fenol.
Tulpinile care fermentează lactoza dau colonii roșii, în timp ce tulpinile care nu fermentează sunt incolore. Această caracteristică este importantă, deoarece Salmonella și Shigella nu fermentează lactoza..
Pe de altă parte, acest mediu conține tiosulfat de sodiu ca sursă de sulfură și citrat feric ca sursă de fier. Ambii compuși sunt capabili să diferențieze bacteriile capabile să producă hidrogen sulfurat. Acestea reacționează pentru a forma un precipitat vizibil, insolubil de sulfură ferică neagră..
Această proprietate se găsește în unele tulpini din genul Salmonella. În mod normal, coloniile lor sunt plate incolore, cu un punct negru în centrul acestuia. Restul de Salmonella nu produc HDouăS și se dezvoltă ca colonii incolore.
Pe de altă parte, coloniile din genul Shigella sunt plate incolore, fără să se înnegrească..
Acest mediu este foarte simplu de preparat.
Se cântăresc 63 g de mediu comercial deshidratat și se dizolvă într-un litru de apă distilată. Se încălzește soluția și se agită. Amestecul poate fierbe până la câteva minute.
Acest mediu nu trebuie autoclavizat. După dizolvare, se servește direct pe plăci sterile simple sau duble..
Când se solidifică, acestea sunt aranjate în mod inversat în plachere și depozitate la frigider (2-8 ° C) până la utilizare..
Mediul după preparare trebuie să fie la pH 7,2 ± 0,2 și cu o culoare roșu-portocaliu..
Este important să permiteți plăcilor să se încălzească înainte de însămânțarea probelor. Eșantionul original poate fi semănat direct, descărcând material pe o parte a agarului și apoi strecurându-se prin epuizare de acolo.
În cazul utilizării bulionelor îmbogățite, treceți o porție din bulionul de selenită și semănați cu o spatulă drigalski.
Se incubează la 37 ° C timp de 24 de ore în aerobioză.
Trebuie luat în considerare faptul că numărul de grame care trebuie cântărite și pH-ul final al mediului pot varia de la o casă comercială la alta. Baza de mijloc aduce întotdeauna indicațiile pentru pregătirea sa.
Este frecvent utilizat în analiza culturii scaunelor și în studiul microbiologic al apelor uzate, al apei potabile și al probelor alimentare..
Se prepară frecvent plăci duble, pe o parte se pune agar Salmonella-Shigella și pe cealaltă agar XLD.
-Unele tulpini Shigella nu cresc pe acest mediu. Prin urmare, nu se recomandă izolarea primară a acestui gen..
-Nu orice colonie transparentă cu un centru negru este indicativă pentru Salmonella; Testele biochimice trebuie efectuate pentru a face o identificare corectă, deoarece coloniile unor tulpini Proteus nu se pot distinge de cele de Salmonella.
-Mediul deshidratat trebuie îngrijit de la expunerea la mediu, deoarece este foarte higroscopic. Prin urmare, trebuie păstrat într-un mediu uscat și bine închis. Deschis pentru perioade foarte scurte.
-În timp, sărurile biliare din mediu pot precipita, formând o imagine asemănătoare matului în agar, dar acest lucru nu afectează rezultatele..
-Unele tulpini Shigella pot fermenta lent lactoza.
Pentru a dovedi că mediul funcționează corect, este recomandabil să plantați tulpini de control cunoscute sau certificate și să observați dacă creșterea îndeplinește caracteristicile așteptate..
Pentru aceasta puteți folosi tulpini de E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium sau Enterococcus faecalis.
Rezultatele așteptate sunt:
Escherichia coli --colonii convexe roz.
Enterobacter și Klebsiella- colonii mari și mucoizi roșii sau roz.
Shigella flexneri --colonii plate clare sau incolore.
Salmonella typhimurium - colonii incolore cu centrul negru.
Enterococcus faecalis-- inhibiție totală.
Nimeni nu a comentat acest articol încă.