Izolarea microorganismelor tehnice și importante

izolarea microorganismelor implică un set de tehnici utilizate pentru extragerea și separarea speciilor de microbi de interes din habitatul lor natural în habitat in vitro. Aceste tehnici sunt un set de multe instrumente de bază și necesare pentru studii microbiologice..

Majoritatea microorganismelor cunoscute și definite de știință sunt cele care au putut fi izolate și păstrate în containere care simulează, parțial, condițiile intrinseci ale locurilor în care trăiesc..

Poate că unul dintre primii oameni care a practicat izolarea microorganismelor a fost Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723), care a colectat și izolat probe de microbi dintr-un număr mare de locuri și ecosisteme pentru a le observa cu atenție sub sutele de microscopuri pe care le-a proiectat..

Cu toate acestea, abia pe vremea oamenilor de știință Louis Pasteur și Robert Koch, în cursul secolului al XIX-lea, au început să se desfășoare practici riguroase care au servit la izolarea microorganismelor specifice, toate pentru a le putea studia în detaliu..

Spre deosebire de Leeuwenhoek, acești cercetători s-au concentrat pe izolarea speciilor definite de celelalte specii de microbi din mediu. În plus, erau interesați să îi mențină în viață cât mai mult timp posibil în afara mediului lor natural..

În prezent, au fost dezvoltate tehnici precise pentru izolarea și creșterea multor microorganisme diferite obținute din aproape orice mediu din biosferă..

Indice articol

• 1 Tehnici pentru izolarea microorganismelor
  • 1.1 Zgârieturi sau zgârieturi
  • 1.2 Fuziune cu mediu sau acoperire
  • 1.3 Diluții seriale
  • 1.4 Procedura de îmbogățire
  • 1.5 Tehnica unică sau exclusivă
  • 1.6 Tehnici personalizate
• 2 Importanță
• 3 Referințe

Tehnici de izolare a microorganismelor

Toate izolările microorganismelor încep cu colectarea unui eșantion în sălbăticie unde se găsesc microorganismele de interes. Aceste locuri pot fi răni în țesuturi animale sau vegetale, soluri sau substraturi, bălți, mări, suprafețe precum pielea etc..

Prelevarea se efectuează prin atingerea sau susținerea unui recipient care are un mediu cu cerințele adecvate pentru creșterea microorganismelor pe suprafața de care se dorește izolarea. În acest container veți obține ceea ce este cunoscut sub numele de „cultură” de microbi..

În general, prima cultură care se obține din habitate naturale este fără îndoială o „cultură mixtă”, adică este compusă dintr-un număr mare de specii diferite de microbi..

Cu toate acestea, majoritatea speciilor de microorganisme pot fi izolate unele de altele în laborator, căutând să obțină culturi de microorganisme în care crește doar speciile de interes sau, cu alte cuvinte, obținând „culturi pure”.

În esență, procesul care se realizează pentru a obține „culturi pure” este ceea ce este cunoscut sub numele de „izolarea microorganismelor”.

Există un număr mare de tehnici pentru izolarea microorganismelor și există chiar unele specifice unui anumit tip de microorganism, în special. În alte cazuri, este posibil să se obțină o cultură pură doar prin colectarea probei din mediul natural..

Printre tehnicile de izolare cele mai utilizate pentru separarea unei specii de interes găsite în mediile de cultură mixte se numără:

Zgârieturi sau dungi

Poate că aceasta este metoda cea mai utilizată pentru izolarea microorganismelor. Această tehnică constă în prepararea unui mediu solid steril cu toți compușii nutriționali necesari creșterii microorganismului într-un recipient de sticlă, cum ar fi o cutie Petri..

Folosind un instrument fin, în general ascuțit, microorganismul care trebuie izolat în cultura mixtă este atins, apoi, în mediul solid steril, vârful instrumentului cu care a fost atins microorganismul începe să alunece de la o parte la alta de-a lungul întregului înmatriculare.

Acest lucru se face intens înainte și înapoi pe suprafața mediului solid sau agarizat, ca și cum ar fi un zig-zag. Acest lucru se face de obicei până când se acoperă aproximativ o treime din diametrul agarului de pe placă..

Fuziune cu mediu sau acoperire

Pentru această metodă, o diluție a mediului în care trăiesc microbii colectați este efectuată până la punctul în care rămân doar câteva sute de celule pentru fiecare mililitru al mediului în care au fost diluați..

Din această diluare se iau câțiva mililitri și se amestecă cu mediul care va fi adăugat în recipient înainte ca acesta să se solidifice. Pe măsură ce se face un amestec între mediul agarizat și mediul lichid în care se află microorganismele, acestea rămân scufundate în mediu și sunt vizibile doar până când proliferează sub forma unei colonii..

Pe măsură ce se dezvoltă ca o colonie, devine mai ușor să le separați de restul microorganismelor cu alte metode, cum ar fi zgârierea, de exemplu.

Diluții seriale

Această metodă constă în realizarea de diluții seriale ale mediului în care se găsesc microorganismele. Un exemplu în acest sens sunt diluțiile care se fac pentru a purifica Lactococcus lactis sau Lactobacillus acidophilus, bacterii responsabile de producția de brânză și iaurt.

Aproximativ 1 mililitru este luat dintr-un tub care conține lapte acru sau iaurt fermentat anterior și acest mililitru este inoculat în lapte steril fără microorganisme. Mai târziu, se ia aproximativ un mililitru din laptele menționat și procesul se repetă.

Acest lucru se repetă de aproximativ trei sau patru ori la rând, ceea ce este foarte probabil să obțină Lactococcus lactis sau Lactobacillus acidophilus într-un mediu izolat de contaminanți care pot reprezenta alți microbi.

Procedura de îmbogățire

Această metodologie se realizează prin creșterea microorganismelor în mediile de cultură cu condiții care stimulează sau facilitează creșterea speciilor de interes și, în multe cazuri, în condiții care inhibă creșterea altor microorganisme contaminante..

Bacteriile genului Salmonella Ele cresc în medii de cultură îmbogățite cu selenit, deoarece aceste microorganisme transformă selenitul în seleniu pentru a-l metaboliza. Selenitul din mediu face dificilă asimilarea nutrienților pentru alte microorganisme decât salmonelele..

Tehnica unică sau exclusivă

Poate că aceasta este cea mai dificilă și mai puțin eficientă tehnică pentru izolarea microbilor. Aceasta implică plasarea unei picături de mediu (eșantion) în care sunt adăpostite microorganismele pe o lamă de acoperire sterilă și apoi plasarea acestuia pe stadiul microscopului..

Mai târziu, în timpul observării, o singură celulă este îndepărtată cu ajutorul unei micro-pipete sterile. Picătura este plasată pe o altă lamă sterilă care este incubată la temperatura adecvată pentru microorganism. În cele din urmă, este observat din nou la microscop pentru a arăta creșterea.

Dacă s-au dezvoltat noi celule dintr-o singură celulă luată la re-observare, acestea sunt adăugate la un mediu de cultură steril pentru a obține o cultură pură complet izolată..

Tehnici personalizate

Există nenumărate microbi diferiți pe planeta Pământ, care sunt împrăștiați în aproape fiecare ecosistem cunoscut. Unele microorganisme sunt cunoscute sub numele de Extremophiles și necesită condiții unice pentru dezvoltarea și creșterea lor..

Aceste condiții extreme sunt atât avantajoase, cât și dezavantajoase pentru izolare, deoarece, deși permit doar creșterea acestor microorganisme, pot fi dificil de recreat in vitro.

Importanţă

Izolarea microorganismelor a reprezentat unul dintre cele mai importante progrese pentru domeniul științei și medicinei. Acest lucru a permis umanității să studieze și să dezvolte tratamente eficiente împotriva diferiților agenți patogeni microbieni..

În prezent se știe cu siguranță că microorganismele formează o parte esențială a tuturor ecosistemelor, astfel încât realizarea izolării unora dintre ele cu importanță relativă pentru om permite cercetătorilor să le studieze intens, pentru a înțelege în profunzime rolul său în fiecare ecosistem.

Referințe

1. De Kruif, P. (1996). Vânătorii de microbii. Houghton Mifflin Harcourt.
2. López, M. J., Nichols, N. N., Dien, B. S., Moreno, J. și Bothast, R. J. (2004). Izolarea microorganismelor pentru detoxifierea biologică a hidrolizatelor lignocelulozice. Microbiologie aplicată și biotehnologie, 64(1), 125-131.
3. Spigno, G., Tramelli, L., Galli, R., Pagella, C. și De Faveri, D. M. (2005). Biofiltrarea vaporilor de diclormetan: izolarea microorganismelor.
4. Tresner, H. D. și Hayes, J. A. (1970). Metodologie îmbunătățită pentru izolarea microorganismelor din sol. Aplic. Mediu Microbiol., 19(1), 186-187.
5. Willey, J. M., Sherwood, L. și Woolverton, C. J. (2009). Principiile microbiologice ale lui Prescott. Boston (MA): Învățământul superior McGraw-Hill.