Frotiu de sânge Este un frotiu de sânge periferic care este utilizat pentru a analiza componentele prezente în circulația sângelui. Observarea unui frotiu de sânge oferă date hematologice care sunt foarte utile pentru diagnosticul și urmărirea multor patologii..
Frotiul de sânge permite cuantificarea numărului diferitelor tipuri de celule albe din sânge (formula leucocitelor), precum și analiza morfologiei și formei eritrocitelor, leucocitelor și trombocitelor.
Poate detecta anomalii ale numărului de celule, precum: leucocitoză sau leucopenii, limfocitoză sau limfopenie, neutrofilie sau neutropenie, trombocitoză sau trombocitopenie și eozinofilie. De asemenea, pot fi observate anomalii ale formei și dimensiunii celulei..
În plus, este posibil să se detecteze diferite tipuri de anemii, leucemii și infecții bacteriene sau parazite din sânge..
Pentru aceasta, există diferite tipuri de frotiuri care se efectuează în funcție de scopul studiului. Există frotiuri subțiri și frotiuri groase. Aceste frotiuri diferă în tehnica de execuție și în scopul studiului..
Cele cu picături fine sunt utilizate ca adjuvant pentru completarea hematologiei. Aceasta oferă date despre formula leucocitelor, pe lângă analiza formei și morfologiei celor trei serii de celule care alcătuiesc sângele: seria roșie, seria albă și trombocitele. Deși servesc și ca o completare a studiului filmului de sânge gros.
Folia de sânge groasă este utilizată pentru diagnosticarea bolilor cauzate de hemoparazite, cum ar fi malaria sau malaria, toxoplasmoza, leishmanioza, boala Chagas, babezioza și microfilariaza.
Indice articol
Un frotiu bun de sânge trebuie să îndeplinească anumite caracteristici. Printre acestea putem menționa:
-Eșantionul trebuie să îndeplinească cerințele minime de calitate pentru a fi reprezentativ.
-Eșantionarea trebuie să fie bine executată.
-Executarea la timp a frotiului.
-Dacă se efectuează cu sânge venos, utilizați un anticoagulant care nu deformează celulele și amestecați tubul înainte de a lua frotiul..
-Dacă se face cu sânge capilar, aruncați prima picătură.
-Răspândirea trebuie să fie omogenă. Acest lucru asigură faptul că celulele sunt distribuite uniform și că se poate face o bună analiză a celulelor sanguine, în ceea ce privește forma și numărul..
-Părțile laterale ale frotiului trebuie să fie netede de la început până la sfârșit.
-Frotiul trebuie să respecte o margine de 1 până la 2 mm față de părțile laterale ale diapozitivului.
-Stratul de frotiu ar trebui să scadă treptat în grosime de la început până la sfârșit (frotiu cu picătură subțire prin metoda glisării).
-Trebuie etichetat corespunzător pentru a evita confuzia eșantionului.
-Se fixează și se colorează corespunzător pentru observarea clară a elementelor sanguine.
-Lăsați frotiul să se usuce foarte bine înainte de a monta preparatul la microscop. Plasarea cu ulei pe un frotiu umed va provoca formarea micelelor care împiedică observarea celulelor..
Frotiurile de sânge periferice pot fi clasificate în frotiu subțire și frotiu gros. Cele cu un strat subțire sunt utilizate pentru studiul formulei leucocitelor și pentru observarea morfologică a celulelor sanguine. De asemenea, puteți vedea bacterii extracelulare, cum ar fi borrelia și hemoparaziți intracelulari, cum ar fi plasmodium, printre altele..
În blobul fin, specia parazitului poate fi identificată, prin urmare, este o tehnică mai specifică decât blobul gros, dar blobul gros este mai sensibil, deoarece este o tehnică de concentrare utilizată pentru căutarea exhaustivă a hemoparaziților extracelulari..
Există două tipuri de frotiuri cu picături fine: cele efectuate pe diapozitive și cele efectuate pe lamele de acoperire. Frotiurile groase sunt efectuate pe diapozitive.
Frotiurile de sânge pot fi făcute dintr-o puncție capilară sau o probă venoasă luată cu anticoagulant. Dacă se face din sânge cu anticoagulant, frotiul poate fi preparat până la 2 ore după prelevarea probei..
Trebuie avut grijă la utilizarea anticoagulanților care nu deformează celulele sanguine. Cea mai bună opțiune este EDTA. Dimpotrivă, ar trebui evitată utilizarea anticoagulantelor, cum ar fi citratul trisodic..
Dacă proba este prelevată prin puncție capilară, frotiul trebuie extins imediat, înainte ca cheagurile de sânge.
Prima picătură trebuie aruncată, permițând următoarei picături să scape spontan pentru a evita diluarea probei cu lichidul tisular. Este cea mai recomandată tehnică de observare a morfologiei celulare, deoarece sângele nu are aditivi.
Pentru observarea hemoparaziților, Solari și colab. Au concluzionat în cercetările lor că ambele tehnici (venipunctură și capilară) sunt la fel de eficiente..
Frotiul de sânge poate fi efectuat manual pe lamele de microscop sau pe lamele de acoperire sau lamele. De asemenea, este posibil prin echipamente automate.
Este tehnica preferată de majoritatea laboratoarelor datorită manipulării sale ușoare.
Folosind o pipetă Pasteur, puneți o picătură de sânge nu foarte groasă sau foarte fină în centrul unui capăt al unui diapozitiv de microscop curat..
Frotiul este realizat cu ajutorul unei alte lamele cu capăt la sol. Lamela de sticlă măcinată este plasată perpendicular pe capătul opus al picăturii..
Se înclină la un unghi între 30 - 45 ° și alunecă spre picătură; Când este atins, se extinde liniar peste marginea alunecării solului și cu o mișcare constantă și definită, foaia revine; înainte de a ajunge la capăt toboganul este ridicat.
În acest fel, un strat omogen este răspândit pe suprafața lamei de recepție..
Frotiul se lasă să se usuce. Apoi este fixat și colorat cu pata preferată. Lăsați să se usuce bine înainte de a vizualiza la microscop. O picătură de ulei este plasată pe fața care prezintă frotiul și este observată la microscopul cu lumină.
În acest tip de frotiu, se pot distinge trei zone definite: capul, corpul și coada. Capul corespunde zonei de unde începe frotiul, este zona cea mai groasă și nu este bine să se observe.
Corpul este partea centrală sau intermediară a frotiului, este cea mai bună zonă de observat la microscop, deoarece acolo celulele sunt uniform distribuite și morfologia lor este păstrată.
Coada corespunde părții finale a frotiului; aici distribuția nu mai este uniformă și morfologia eritrocitară tinde să se piardă.
În această tehnică joacă un rol fundamental:
-Curățarea și degresarea lamelei microscopului: asigură o lamă bună a specimenului.
-Dimensiunea picăturii: cu picături foarte mari se va obține un frotiu mai gros și mai lung, cu o picătură foarte mică răspândirea va fi mai scurtă și extrem de fină.
-Viteza aplicată în extensie: cu cât viteza este mai mică, frotiul va fi mai subțire, cu atât va fi mai mare viteza.
-Unghiul de execuție: cu cât unghiul este mai mic, cu atât este mai fin frotiul, cu atât unghiul este mai mare, cu atât este mai gros.
Nu este utilizat pe scară largă, deoarece este dificil să se ocupe de acoperișurile fragile, însă oferă avantaje mari, deoarece se obține o distribuție mai bună a celulelor pe tot frotiul..
O picătură nu foarte groasă sau foarte fină este plasată în centrul unei lamele. Imediat o altă lamă de acoperire este așezată deasupra acesteia, astfel încât vârfurile ambelor lamele de acoperire să iasă, formând o stea.
Picătura se va răspândi spontan pe suprafața ambelor lamele. La sfârșitul extensiei, fiecare lamelă alunecă rapid către partea opusă (una spre dreapta și cealaltă spre stânga).
Tehnica oferă două frotiuri în loc de una.
Sunt așezate pentru a se usca cu partea întinsă în sus. Odată uscat, este fixat și colorat cu tehnica la alegere. Lasă-l să se usuce. O picătură de ulei de imersie este plasată pe o lamă, frotiul este plasat cu frotiul în jos și observat la microscop..
Pentru a obține un frotiu bun pentru această tehnică, este important să:
-Curățarea lamelelor de acoperire (ajută la alunecarea bună a probei).
-Dimensiunea picăturii (influențează grosimea frotiului).
-Viteza cu care sunt separate lamelele de acoperire (influențează omogenitatea frotiului).
Acestea pot fi realizate prin oricare dintre aceste echipamente: Spinner și Autoslide.
Spinner-ul constă în plasarea unui diapozitiv cu o picătură de sânge pe o placă de centrifugă specială. Proba este centrifugată la viteze mari; în acest fel, se formează un frotiu omogen și fin al probei. Dezavantajul posibilității hemolizei probei.
Autoslide este un instrument care efectuează mecanic mișcările pentru executarea frotiului pe diapozitive. De asemenea, puteți repara și colora frotiul. Poate fi chiar adaptat unor contoare automate de hematologie.
Pentru a căuta hemoparaziți, se recomandă efectuarea a două frotiuri: unul cu picătură fină și unul cu picătură groasă..
Efectuați o puncție capilară, curățați prima picătură. Așezați o picătură fină pe un diapozitiv și frotiți așa cum s-a explicat anterior. Pentru mărgele groase, așezați o mărgele mare pe o altă lamă și întindeți-o într-un pătrat de 1,55 mm. Lasă cele două frotiuri să se usuce.
Pentru cei cu picături fine, pot fi folosite pete Giemsa sau Wright, printre altele. Pata Giemsa sau May-Grunwald Giemsa este recomandată pentru frotiurile groase.
Frotiul se fixează timp de 3 minute cu metanol, se scurge și se lasă să se usuce din nou. Frotiul este apoi acoperit cu pata Giemsa timp de 10-15 minute. Se spală cu apă distilată și se lasă să se usuce. Pentru a observa la microscop se pune o picătură de ulei de imersie.
Frotiul este acoperit cu pata Wright timp de 5 minute. Aruncați și așezați soluția tampon la pH 6,8 timp de 6 minute. Suflați preparatul pentru omogenizare. Se spală cu apă distilată și se lasă să se usuce. Observați la microscop.
Apare la cursanții tehnicii de cădere fină cu diapozitive.
Acest lucru se datorează faptului că mișcarea executată nu a fost constantă în timpul răspândirii, făcând opriri și reporniri.
Au două cauze: una se datorează faptului că alunecarea la sol a fost ridicată înainte de a ajunge la celălalt capăt al alunecului. În acest caz este extrem de gros și scurt.
Pe de altă parte, dacă frotiul este scurt, dar subțire, se întâmplă deoarece dimensiunea picăturii a fost foarte mică..
Are mai multe cauze: una este că marginea de la sol este defectă, că presiunea exercitată pe lamela de recepție este crescută în momentul răspândirii sau că marginea de la sol a lamelei este uzată..
Acestea se datorează utilizării frotiurilor grase (slab spălate și degresate).
Picăturile care sunt prea mari vor produce frotiuri foarte groase de la început până la sfârșit, iar picăturile foarte mici vor produce frotiuri foarte fine.
Celulele sanguine pot fi văzute într-un frotiu de sânge. Printre acestea se numără:
Numărul de eritrocite sau de celule roșii din sânge este de aproximativ 5 x 106 mm3 la om și 4,5 x 106 la femei. Celulele roșii din sânge au formă de discuri biconcave, cu o paloare fiziologică centrală. Poate fi văzut separat (normal) sau stivuit în roluri (anormal).
Frotiurile prezintă, de asemenea, poikilocitoză (celule roșii de diferite forme), anizocitoză (celule roșii de diferite dimensiuni), anisopoikilocitoză (diferite forme și dimensiuni), anisocromie (culori diferite), eritroblaste (celule roșii imature), microcitoză (celule roșii mai mici) și macrocite (eritrocite mai mari).
Când prezintă o deficiență a cantității de hemoglobină și paloarea centrală crește, se spune că există hipocromie. Când se observă o serie roșie normală, aceasta va fi raportată ca normocitică și normocromă..
Cantitatea normală variază de la 5.000 la 10.000 mm3. Acestea sunt modificate în procesele infecțioase, în alergii și în leucemie. În frotiul de sânge, se pot distinge mai multe tipuri, care sunt explicate mai jos.
Ele reprezintă 55-65% din totalul leucocitelor. Ele măsoară între 10-15 μm. Au un nucleu segmentat sau lobat care adoptă diverse morfologii, de aceea se numește polimorfonuclear.
Au granule neutrofile abundente în citoplasma lor și unele azofile. Creșterea infecțiilor bacteriene (neutrofilie), scăderea infecțiilor virale (neutropenia).
Se pot observa anomalii morfologice, cum ar fi pleokariocitoza (nuclei hipersegmentați), arcada (celule imature) sau macropolicite (de formă ovală și mare)..
Alte modificări:
-Granulații toxice
-Neutrofile pseudo Pelger (nucleul este nelobat sau bilobat).
-Corpuri Döhle: incluziuni citoplasmatice de culoare albastru închis.
-Creșterea bazofiliei citoplasmatice.
-Vacuole intracitoplasmatice.
-Picnoza celulară (pierderea punților internucleare).
Ele reprezintă 1-3% din totalul celulelor albe din sânge. Ele măsoară 9-10 μm. Acestea se caracterizează prin prezența unor granule citoplasmatice acidofile abundente și a puțini azurofili. Nucleul său are două lobulații. Numărul lor crește în alergii și boli de origine parazitară.
Sunt extrem de rare, reprezentând 0-1% din leucocite. Ele măsoară 10-12μm. Nucleul este de obicei neregulat la margini și poate fi bilobat, dar nu este observat din cauza numărului mare de granulații grosiere bazofile din citoplasma sa. Foarte rar se poate observa bazofilie.
Sunt celule mici cu citoplasmă bazofilă, cu un nucleu bine definit, rotund, cu cromatină condensată. Nucleul cuprinde aproape întreaga celulă. Ele reprezintă 26-40% din leucocitele din sânge. Ele cresc în infecții virale (limfocitoză). Se pot vedea limfocite reactive.
Celule mai mari decât limfocitele, cu citoplasmă mai mare și nuclei ovali de cromatină mai slabi. Ele măsoară 9-12μm. Citoplasma este abundentă și apare de obicei albastru-cenușiu pal cu tehnici standard de colorare. Monocitele vacuolate și monocitoza pot fi observate printre modificări..
Ele măsoară între 1,5-3 μm. Forma sa este rotundă sau ovală. Valoarea normală variază de la 150.000 la 350.000 trombocite / mm3. Ele pot scădea în unele infecții virale. Nu au nucleu și sunt colorate în violet. Anomalii pot fi observate în această serie, cum ar fi macro sau micro trombocite, trombocitoză sau trombocitopenie și fragmente de trombocite.
Hemoparazitii, cum ar fi agentul cauzal al malariei sau al malariei (paraziți din genul Plasmodium), pot fi observați în frotiurile de sânge. Din acest motiv, este important ca frotiul să fie analizat manual, deoarece echipamentele automatizate trec cu vederea această constatare..
În patologii precum febra recidivantă sau boala Lyme, poate fi observat agentul său cauzal. În acest caz corespunde spirochetelor Borrelia recurrenti Cu toate acestea Borrelia burgdorferi în frotiu de sânge.
Se observă cazuri severe în leucemii, reacții leucemoide și reacții leucoeritroblastice, printre altele. În infecțiile bacteriene pot exista ușoare abateri la stânga (prezența escrocilor). Eritroblastele pot fi observate și în unele anemii.
Nimeni nu a comentat acest articol încă.