orceină este o culoare purpurie naturală, extrasă din diverși licheni, cum ar fi: orchilla sau urchilla, lichen fruticoso, Rocella tinctoria Da Lecanora parella în principal. Rocella tinctoria Se găsește pe continentul african și american, deși poate fi înlocuit cu alte specii situate în Europa.
Această pată a fost utilizată pe scară largă în studiile citogenetice din cele mai vechi timpuri. În acest sens, preparatul de orceină care include acid acetic a fost introdus de LaCourt în 1941, motiv pentru care a fost numit inițial tehnica LaCourt..
De asemenea, datorită simplității și costului redus, a fost utilizat pentru fabricarea turnasolului (colorant extras din licheni) și în studii histologice (colorarea celulelor și a țesuturilor)..
Mai multe studii au folosit această pată combinată cu alte substanțe chimice, cum ar fi picrocarminatul de amoniac și acidul acetic, pentru a colora fibrele elastice și respectiv cromozomii. În prezent, orceina continuă să fie utilizată în studiile citogenetice la animale și plante..
Recent, Silva și colab. 2017 a folosit cu succes această pată pentru a observa diferitele modificări care apar în fibrele elastice ale pielii degetului mare la adulții chili în vârstă. Acest studiu a relevat modul în care fibrele degetului mare se modifică odată cu îmbătrânirea.
În acest sens, s-a observat că fibrele elastice au o culoare maroniu-negru la persoanele cu vârsta peste 80 de ani; în timp ce la cei mai tineri (de la 60 de ani) sunt văzuți ca o culoare maro-roșiatică. Citoplasma și alte structuri celulare devin verde gălbui.
Acest lucru a permis coroborarea prezenței și stării fibrelor elastice, în ceea ce privește dispoziția, cantitatea și integritatea acestora. Pe de altă parte, s-a mai subliniat că orceina este de mare ajutor pentru identificarea anevrismelor și diagnosticarea arteritei, printre alte afecțiuni..
Indice articol
Orceina face parte din grupul de coloranți oxazină, iar colorarea se bazează pe afinitatea sa pentru ADN. Colorantul se leagă de sarcina negativă a acestei molecule, reprezentată de gruparea fosfat. De aceea, cromozomii sunt pata de violet.
Cu toate acestea, restul structurilor celulei capătă o culoare diferită. Mai exact, în cazul fibrelor elastice, acestea sunt colorate în roșu-maroniu, nuclee celulare de la albastru la violet închis, în timp ce colagenul nu se colorează.
Din acest motiv, orceina este utilizată pentru a colora cromatina și a diferenția sexul la unele specii de muște. De asemenea, nucleele și unele incluziuni hepatice produse de antigenii hepatitei B pot fi colorate..
Soluțiile de Orcein au funcții specifice în colorare. Orceina A are funcția de a înmuia membranele celulare, provocând moartea acestora și paralizând procesul de diviziune a acestora. Între timp, orceina B este însărcinată cu completarea colorării prin aderența sa la cromozomi..
Pentru a prepara o soluție de 1% de aceto-orceină, se dizolvă 2 grame de orceină în 45 ml de acid acetic glacial, de preferință fierbinte, și se adaugă 55 ml de apă distilată la temperatura camerei..
Apoi, se amestecă constant pentru a omogeniza soluția, pentru a o lăsa mai târziu să se răcească. În cele din urmă, se păstrează la 4 ° C în sticle întunecate. Acest preparat a fost folosit de Flores 2012 pentru a observa fazele de maturare a ovocitelor de vacă..
În acest caz, de exemplu, soluția de aceto-orceină este plasată pe țesutul fixat anterior în acid acetic-etanol timp de 24 de ore. Acest proces de colorare este efectuat timp de 30 de minute și țesutul este decolorat ulterior..
De asemenea, poate fi utilizat la identificarea organelor din țesuturile multicelulare. În acest caz, un frotiu al mucoasei bucale este colorat cu o picătură de soluție de aceto-orceină, capacul este așezat pe lamelă și imediat se poate observa nucleul celulei cu substructurile sale.
În plus, orceina poate fi preparată cu alte substanțe chimice, cum ar fi acidul lactic și acidul propionic. Pentru a face acest lucru, un gram de orceină este dizolvat într-o soluție premixată la temperatura camerei de 23 ml de acid lactic și 23 ml de acid propionic; completând volumul cu apă distilată de până la 100 ml.
Cu această soluție de orceină lacto-propionică este posibil să se observe diferitele faze ale diviziunii meiotice a celulelor vegetale. În acest caz, proba pre-fixată și hidrolizată este plasată timp de 15 minute în soluția de orceină lacto-propionică și apoi țesutul este împrăștiat pe lamele de microscop..
În studiul lui Duque din 2016 privind cromozomii din polietilenă, a folosit un preparat de 2 grame de orceină diluat în acid acetic și 85% acid lactic, diluat cu o soluție de acid acetic 65%. În cele din urmă, s-a uitat la cromozomii din glandele salivare ale Drosophila melanogaster.
Este important de reținut că, în funcție de eșantion și de ceea ce urmează să fie evaluat, se prepară soluția de orceină adecvată. Astfel, de exemplu, acid clorhidric 1N este adăugat la soluția de orceină A pentru a observa celulele care se divid..
În timp ce soluția de orceină B este dizolvată în acid acetic 45%. Această tehnică este o metodă prescurtată de colorare și este în general utilizată ca adjuvant la colorarea structurilor cromozomiale..
Din secole trecute, în țările continentului american, cum ar fi Argentina, puteți obține licheni, cum ar fi: Lecanora, Parmelia Da Umbilicaria, care sunt mari surse de orceină. De asemenea, zonele europene, precum Insulele Canare, erau la acea vreme mari producători de orchilă.
Acest lucru a fost exportat în alte orașe de pe același continent, cum ar fi Genova și țări precum Anglia, în timp ce Olanda a monopolizat fabricarea de turnesol din orchilă. Deci, mai târziu, acest lichen a fost redus până când a fost pe cale să dispară.
Acest lucru a dus la înlocuirea orhilei cu alte plante cu proprietăți colorante. Cu toate acestea, apariția coloranților sintetici a contribuit la încetarea comerțului cu această sursă de lichen de orceină..
Acest lucru a fost posibil datorită lui Cocq, care în 1812 a descris sinteza orceinei, știind atunci că este sintetizată de un compus fenolic numit orcinol. Cu toate acestea, în ciuda acestui fapt, orceina naturală este în prezent preferată.
Acest lucru se poate datora faptului că orcinolul este un compus cu miros foarte puternic a cărui expunere prelungită ar putea avea riscuri pentru sănătate, cum ar fi pierderea capacității de a detecta mirosurile. Aceste daune ale hipofizei ar putea merge de la temporare la permanente cu cât expunerea este mai mare..
Nimeni nu a comentat acest articol încă.