BIGGY agar fond de ten, preparare și utilizări

1860
Philip Kelley
BIGGY agar fond de ten, preparare și utilizări

Agar BIGGY Este un mediu de cultură solid, selectiv și diferențial. A fost conceput pentru a izola și a ajuta la identificarea principalelor specii de Candida. Numele său BIGGY provine de la acronimul în limba engleză Bismuth Glucose Glicine Yeast.

Formula originală a fost creată de Nickerson, motiv pentru care acest mediu este cunoscut și sub numele de agar Nickerson. În prezent este compus din extract de drojdie, glicină, dextroză, citrat de amoniu, citrat de bismut, sulfit de sodiu și agar..

Reprezentarea grafică a agarului BIGGY. Sursa: Flickr.com

Agarul BIGGY este formulat pentru diferențierea speciilor Complex C. albicans, C. tropicalis, C. krusei și C. kefyr, dar și alte specii cresc ca Candida glabrata, C. parapsilosis, C. guilliermondii, Trichosporun sp, Geotrichum candidum și Saccharomyces cerevisiae.

Are o bună sensibilitate și specificitate, totuși, în comparație cu alte medii cu funcții similare, se află pe locul al doilea, fiind depășit de CHROMagar. Din acest motiv, multe laboratoare îl preferă pe acesta din urmă, deși este mult mai scump..

Ar trebui să fie clar că utilizarea BIGGY Agar, precum și alte mijloace similare, ajută la o identificare rapidă presupusă, dar niciodată confirmativă. Prin urmare, trebuie să fie disponibile metode suplimentare de identificare; de exemplu, sistemele de identificare Vitek 32 și API 20.

Indice articol

  • 1 Justificare
  • 2 Pregătirea
  • 3 Utilizați
  • 4 Controlul calității
  • 5 Limitări
  • 6 Referințe

Bază

Agarul BiGGY este considerat un mediu parțial selectiv pentru izolarea drojdiilor, în special a genului Candida, deși pot crește alte genuri.

Este, de asemenea, un mediu diferențial, deoarece, în funcție de specia implicată, vor fi observate diferite caracteristici în ceea ce privește aspectul, culoarea, forma și dimensiunea. Este considerat un mediu cromogen, datorită dezvoltării diverselor culori în colonii.

Culoarea coloniilor de drojdie se datorează prezenței sulfatului de bismut în agar. Nickerson a realizat că drojdiile din genul Candida efectuează o reducere extracelulară a sulfatului de bismut, transformându-l în sulfură de bismut (o substanță neagră insolubilă). Acest lucru duce la colonii de culoare maro deschis la negru..

Acest agar conține extract de drojdie și dextroză, care furnizează sursa de nutrienți de bază și energie pentru dezvoltarea drojdiei. Glicina este un stimulent al creșterii drojdiei, inhibând în același timp creșterea anumitor bacterii.

În același sens, amoniul și citratul de bismut, precum și sulfitul de sodiu acționează ca inhibitori ai creșterii bacteriene. Agar este agentul care conferă consistenței solide medii.

Pregătirea

Se cântăresc 45 g de mediu de cultură deshidratat și se dizolvă într-un litru de apă distilată. Se agită și se încălzește amestecul, fierbând 1 minut până se dizolvă complet. Acest mediu de cultură nu este autoclavabil.

Când se răcește la aproximativ 45 ° C într-o baie de apă, se toarnă 20 ml pe vasele Petri sterile..

Culoarea mediului deshidratat este cenușiu gălbui și preparat este un gel alb gălbui, în care se poate observa un ușor precipitat floculant.

PH-ul trebuie să fie de 6,8 ± 0,2.

Mediul preparat trebuie păstrat la frigider (4 ° C) și ferit de lumină. Deoarece este un mediu care nu poate fi autoclavizat, acesta trebuie utilizat cât mai curând posibil. Se recomandă utilizarea acestuia în termen de 3 zile de la preparare.

Utilizare

Plăcile sunt incubate la temperatura camerei (25 ° C) timp de 24, 48 și 72 de ore, iar timpul de incubare poate fi prelungit până la 5 zile..

Fiecare specie de Candida dezvoltă anumite caracteristici care se deosebesc una de alta. Producătorii de mediu descriu următoarele caracteristici pentru fiecare specie:

-Complexul Candida albicans: se dezvoltă pe acest agar ca colonii netede, rotunde, maronii sau negre, cu o ușoară margine miceliană. Cu excepția faptului că culoarea închisă nu se difuzează pe mediu.

-Candida tropicalis: coloniile sunt luminoase, mici, maro închis, cu un centru negru și o ușoară margine miceliană. Culoarea închisă se difuzează spre mijloc, caracteristică tipică acestei specii, după ce a fost incubată timp de 72 de ore..

-Candida krusei dezvoltă colonii mari, plate, aspre, cu o margine maro până la negricioasă.

-Candida parakrusei: colonii mijlocii, de cele mai multe ori aspre, plate. Culoarea poate varia de la maro roșu închis strălucitor până la maro roșcat deschis. Granița coloniilor are miceliu extins, gălbui.

-Candida stellatoidea: Dezvoltă colonii medii, plate, maro închis, aproape negre. Dezvoltarea micelială este foarte redusă.

Un studiu realizat de Yücesoy și Marol în 2003, a arătat că mediul CHROMagar are o mai bună sensibilitate și specificitate pentru diferențierea și identificarea diferitelor specii de Candida decât agar BIGGY..

QA

Pentru controlul sterilității, plăcile neinoculate sunt incubate la 25 ° C, în întuneric timp de 24 până la 48 de ore, este de așteptat să nu existe creșteri de niciun fel sau schimbări de culoare..

Tulpinile ATCC recomandate pentru controlul calității mediului sunt:

Complexul Candida albicans  ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida krusei ATCC 34135. În toate acestea, se așteaptă o creștere așa cum este descris mai sus..

Se pot utiliza și următoarele tulpini:

Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 și Stafilococ epidermid ATCC 12228. În primele două, se așteaptă o inhibare totală, dar în cazul coloniilor parțial în creștere vor fi de culoare crem.

În cazul în care S. aureus se așteaptă să fie total inhibat, dar dacă cresc parțial coloniile lor sunt albe.

Limitări

Unele bacterii sunt capabile să se dezvolte în acest mediu și chiar pot deveni de culoare închisă, simulând o colonie Candida, dar atunci când fac o frotiu a coloniei și o observă la microscop, este ușor aruncată.

Tabel: Caracteristicile coloniilor unor drojdii pe agar BIGGY în funcție de activitatea de Yücesoy M și Marol S..

Sursă: Yücesoy M, Marol S. Performanța CHROMAGAR candida și agar BIGGY pentru identificarea speciilor de drojdie. Ann Clin Microbiol Antimicrob. 2003; 2 (8): 1-7

Referințe

  1. Yücesoy M, Marol S. Performanța CHROMAGAR candida și agar BIGGY pentru identificarea speciilor de drojdie. Ann Clin Microbiol Antimicrob. 2003; 2 (8): 1-7.
  2. MCD LAB. Fișa tehnică Agar BIGGY. Disponibil la: mcdlab.net/
  3. Laboratorul Neogen. BIGGY Agar. Disponibil la: foodsafety.neogen.com
  4. Laboratoarele Conda Pronadisa. Agar BIGGY. Disponibil la: condalab.com
  5. Laboratoarele BD. Agar BD BiGGY (Agar de drojdie cu glicină glicină Bismut). 2011. Disponibil la: bd.com

Nimeni nu a comentat acest articol încă.