Teste încrucișate pentru ce sunt, tehnică, rațiuni, faze

4483
Basil Manning

 crossmatch sunt o serie de studii de laborator care se efectuează pentru a determina dacă produsele sanguine de la un donator (în principal sânge integral și concentrate de celule sanguine) sunt compatibile cu sângele destinatarului.

Este un test complementar pe lângă compatibilitatea ABO și factorul Rh. Motivul încrucișării este că uneori doi indivizi (donator-primitor) pot avea același grup ABO și Rh, dar totuși sângele lor este incompatibil..

Sursa: unsplash.com

O astfel de incompatibilitate se datorează prezenței anticorpilor împotriva unei serii de proteine ​​ale globulelor roșii cunoscute sub numele de antigeni minori. Acești antigeni nu sunt testați de rutină, deoarece sunt pentru grupul sanguin (ABO) și factorul Rh.

Acest lucru se datorează faptului că antigenele minore sunt mult mai puțin frecvente și au o expresie variabilă la fiecare individ, prin urmare este practic imposibil să le grupăm în categorii, așa cum se face cu grupul și factorul Rh..

În schimb, globulele roșii donatoare sunt amestecate cu serul pacientului (testul de potrivire majoră) și celulele roșii ale pacientului cu serul donatorului (testul de potrivire minoră) pentru a detecta prezența reacțiilor antigen-anticorp..

Când există anticorpi împotriva antigenilor minori, fie în serul pacientului, fie al donatorului, se spune că testul este pozitiv, deci în majoritatea cazurilor acea unitate de sânge nu poate fi transfuzată.

Indice articol

  • 1 Grup ABO
    • 1.1 Anticorpi naturali
    • 1.2 Antigeni și anticorpi legați de grupa sanguină
    • 1.3 Incompatibilitatea grupului ABO
  • 2 Antigene minore 
    • 2.1 Imunitatea încrucișată
  • 3 Pentru ce este crossmatching?
  • 4 Justificare
    • 4.1 Tipuri de reacții încrucișate
  • 5 etape
  • 6 Tehnica
    • 6.1 Faza salină
    • 6.2 Faza termică
    • 6.3 Faza Coombs
  • 7 Referințe 

Grupul ABO

Pentru a înțelege pe deplin despre ce sunt reacțiile încrucișate, trebuie mai întâi să cunoașteți elementele de bază despre grupele de sânge..

În acest sens, cel mai important lucru este să știm că sângele poate fi clasificat în patru grupe: A, B, AB și O.

Fiecare dintre aceste grupuri exprimă o anumită proteină (antigen) pe suprafața celulelor roșii din sânge, care este identificată ca un element străin de anticorpii unui receptor potențial al unui grup diferit..

Cel mai izbitor lucru despre reacțiile antigen-anticorp în potrivirea sângelui este că nu este necesară o expunere prealabilă la antigen pentru ca anticorpii să existe. Acest lucru este cunoscut sub numele de anticorpi naturali..

Anticorpi naturali

În general, pentru a exista anticorpi în corpul unei persoane, este necesar ca celulele albe din sânge să fie expuse anterior la antigen.

Aceasta înseamnă că la primul contact dintre antigenul străin și organism nu există anticorpi, deoarece aceștia sunt generați ulterior, după contactul inițial. Prin urmare, este imposibil ca sistemul imunitar să aibă anticorpi împotriva, de exemplu, unui anumit virus, dacă nu a fost expus acestuia în trecut..

Singura excepție de la cele de mai sus sunt antigenele anti-AB. În aceste cazuri, persoana are anticorpi împotriva antigenului pe care globulele lor roșii nu le au, chiar dacă nu au fost niciodată în contact cu globulele roșii ale altcuiva. Acest lucru este cunoscut sub numele de anticorpi naturali..

Antigeni și anticorpi legați de grupa sanguină

Grupurile de sânge sunt determinate în cazul sistemului ABO de prezența unor antigeni specifici (A sau B) pe membrana globulelor roșii și, în schimb, anticorpi împotriva antigenului absent pe membrana eritrocitară..

Astfel, o persoană cu grupa sanguină A exprimă antigenul A pe suprafața celulelor roșii din sânge, în timp ce în ser există anticorpi anti-B..

Dimpotrivă, la pacienții din grupul B, antigenul B se găsește în timp ce anticorpii sunt anti-A. 

Acum, pacienții cu sânge AB au atât antigeni A, cât și B. Prin urmare, nu există anticorpi, deoarece acest lucru ar distruge globulele roșii ale persoanei respective.. 

Dimpotrivă, apare în grupul O, unde membrana eritrocitară nu prezintă niciunul dintre cei doi antigeni (nici A, nici B), în timp ce în ser există anticorpi anti-A și anti-B.

Incompatibilitatea grupului ABO

Din cele de mai sus, compatibilitatea grupelor sanguine ABO poate fi dedusă cu ușurință, deoarece cunoașterea antigenului membranei eritrocitare cunoaște automat anticorpii din ser. Astfel încât:

- Sângele A este compatibil cu grupa A și grupa O..

- Grupa sanguină B este compatibilă cu sângele B și O.

- Persoanele cu grupa O pot primi doar sânge O (deoarece au anticorpi anti-A și anti-B), deși sângele lor este primit de toate celelalte grupuri fără probleme, deoarece nu are antigeni.

- In cele din urma. cei cu grupa sanguină AB pot primi sânge de la toate celelalte grupuri (A, B, O și bineînțeles AB), deoarece nu au anticorpi împotriva niciunui antigen. Cu toate acestea, numai persoanele din grupul AB pot primi sânge AB, deoarece toate celelalte grupuri au anticorpi care ar distruge aceste celule roșii din sânge..

Antigeni minori

La fel ca în cazul grupurilor ABO, o serie de proteine ​​pot fi găsite pe suprafața eritrocitelor care funcționează ca antigene în același mod ca antigenele grupului ABO..

Cu toate acestea, aceste antigene nu sunt prezente la toți indivizii. Combinația lor este eterogenă, iar penetranța (nivelul de exprimare a proteinelor) este variabilă, prin urmare o clasificare în grupuri precum cea care există pentru ABO și Rh este imposibilă. Prin urmare, își derivă numele din „antigeni minori”, cunoscuți și ca „antigeni cu incidență scăzută”.

Deși nu sunt frecvente, pot exista anticorpi naturali împotriva antigenelor minore. Printre acestea cele mai frecvente sunt Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb și Kidd. Toți responsabili de reacții hemolitice și post-transfuzionale foarte grave.

În plus, poate fi cazul sensibilizării împotriva antigenelor minore prin contactul anterior, fie cu proteinele antigenice menționate din cauza transfuziilor anterioare, fie din cauza imunității încrucișate..

Imunitatea încrucișată

Se spune că există imunitate încrucișată atunci când doi antigeni din două surse diferite (de exemplu, o celulă roșie din sânge și o bacterie) sunt foarte asemănători, până la punctul în care anticorpii împotriva uneia dintre aceste proteine ​​antigenice reacționează și cu celălalt, deoarece sunt aproape identic.

Pentru a o înțelege mai bine, luați exemplul ipotetic anterior (antigene dintr-o celulă roșie din sânge și o bacterie). În niciun caz nu există anticorpi naturali, dar dacă o persoană este expusă bacteriei, ei vor genera anticorpi împotriva acesteia..

Astfel de anticorpi vor reacționa ulterior împotriva unei celule roșii din sânge dacă antigenele sale sunt foarte asemănătoare cu cele ale bacteriilor care au determinat formarea anticorpilor..

Dacă se întâmplă acest lucru, celulele roșii din sânge cu acea proteină antigenică nu pot fi date persoanei care are anticorpii, deoarece ar exista respingere. Aici stă importanța reacțiilor încrucișate.

Pentru ce este crossmatching?

Deoarece este imposibil să grupați sângele diferiților indivizi pe baza antigenelor minore, singura modalitate de a ști dacă există anticorpi împotriva antigenilor minori ai celulelor roșii din sânge ale altei persoane în sângele unei persoane este prin intermediul încrucișării..

În acele cazuri în care anticorpii sunt prezenți, se declanșează o reacție de hemoliză sau aglutinare, motiv pentru care se concluzionează că reacția a fost pozitivă; adică există anticorpi împotriva antigenelor minore (deși nu se știe exact care). În caz contrar, testul este negativ.

Bază

Meciurile încrucișate se bazează pe reacția antigen-anticorp. Prin urmare, cu ei este posibil să se detecteze dacă există anticorpi în serul unui destinatar împotriva antigenelor celulelor roșii din sânge ale donatorului (sau invers), inducând o reacție antigen-anticorp.

Dacă nu există anticorpi, nu apare nicio reacție și testul este raportat ca fiind negativ. Dimpotrivă, dacă reacția este pozitivă (există hemoliză sau aglutinare în timpul testului) se poate concluziona că anticorpii sunt prezenți.

În acest sens, este important de menționat că pot exista anticorpi împotriva globulelor roșii atât în ​​serul donator, cât și în cel al receptorului. Acesta este motivul pentru care există două tipuri de reacții încrucișate.

Tipuri de reacții încrucișate

În serul pacientului pot exista anticorpi împotriva eritrocitelor donatoare; dar poate apărea și opusul, adică anticorpi din serul donatorului împotriva globulelor roșii ale pacientului.

De aceea există două tipuri de crossmatch:

- Major crossmatch.

- Meci încrucișat minor.

Ambele tipuri sunt efectuate în mod obișnuit în banca de sânge înainte de transfuzarea produselor din sânge, deoarece dacă oricare dintre teste este pozitivă, există un risc ridicat de reacții de transfuzie care pot pune în pericol viața pacientului.

Major crossmatch

Acest test evaluează dacă serul destinatarului conține anticorpi împotriva globulelor roșii ale donatorului..

Dacă se întâmplă acest lucru, produsele din sânge nu pot fi administrate, deoarece o cantitate mare de anticorpi prezenți în plasma pacientului va distruge celulele roșii din sânge ale donatorului foarte rapid, generând reacții catastrofale în corpul destinatarului în acest proces. Aceste reacții sunt atât de severe încât pot pune viața în pericol..

Meci mic de cruce

În acest caz, se determină dacă există anticorpi împotriva globulelor roșii ale destinatarului în serul donatorului..

Dacă da, anticorpii vor începe să distrugă eritrocitele destinatarului. Cu toate acestea, deoarece cantitatea de anticorpi este limitată, reacția este mai puțin intensă; deși este încă periculos.

Etape

Atât marea, cât și cea mică, sunt împărțite în trei faze:

- Salină.

- Termică sau de incubație.

- Coombs.

În prima fază, celulele roșii din sânge și serul sunt amestecate în soluție salină. Ulterior, se adaugă albumină și proba este incubată la 37 ° C timp de 30 de minute pentru a continua în final cu faza de coombs..

Tehnică

Tehnica crossmatch este relativ simplă, deoarece implică adăugarea de celule roșii din sânge la serul pacientului (crossmatch major), precum și eritrocite primitoare la serul donator (crossmatch minor)..

Pentru a induce reacția antigen-anticorp într-un timp relativ scurt, trebuie urmate o serie de etape standardizate. Acești pași sunt rezumați într-un mod simplificat mai jos.

Este important să rețineți că următoarea secțiune descrie testul de compatibilitate major, deși pașii sunt aceiași pentru testul de compatibilitate minor, dar schimbând originea globulelor roșii și a serului..

Faza salină

- Adăugați într-o eprubetă 2 picături de ser de la destinatar (de la donator dacă este vorba de un crossmatch minor).

- Luați un eșantion de celule roșii din sânge de la donator (de la destinatar, dacă acesta este un meci încrucișat minor).

- Spălați și centrifugați celulele roșii din sânge.

- Resuspendați într-o soluție de 3% până la 5%.

- Așezați o picătură din această soluție în tubul care conține serul destinatarului. .

- Se amestecă ușor.

- Centrifugați.

- Citiți rezultatul pe lampa de afișare.

Faza termică

- Adăugați 2 picături de albumină 22% în tubul în care a fost finalizată faza salină.

- Se incubează la 37 ° C timp de 30 de minute.

- Centrifugați timp de 15 secunde.

- Citiți rezultatul pe lampa de afișare.

Faza Coombs

- Luați celulele din tub și spălați-le cu soluție salină..

- Îndepărtați supernatantul.

- Adăugați două picături de reactiv Coombs.

- Se amestecă ușor.

- Centrifugați timp de 15 până la 30 de secunde.

- Resuspendati celulele si evaluati in lampa de vizionare pentru aglutinare sau hemoliza.

Dacă există aglutinare sau hemoliză în oricare dintre faze, rezultatul este considerat pozitiv..

Referințe

  1. Hall, T. C., Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C. și Dennison, A. R. (2013). Politici privind transfuzia de sânge în chirurgia generală electivă: cum să optimizăm raporturile încrucișate la transfuzii. Medicina transfuzională și hemoterapie40(1), 27-31.
  2. Silvergleid, A. J., Wells, R. F., Hafleigh, E. B., Korn, G., Kellner, J. J. și Grumet, F. C. (1978). Test de compatibilitate utilizând celule roșii din sânge etichetate cu 51 crom la pacienții cu încrucișare pozitivă. Transfuzie18(1), 8-14.
  3. Kulkarni, N., Ali, M., Haray, P. N., Joseph, A. și Masoud, A. (2006). Sistem electronic de potrivire încrucișată. Este necesară o potrivire încrucișată preoperatorie de sânge pentru rezecțiile colorectale mai mult?. Endoscopie38(11), Poster_50.
  4. Heal, J. M., Blumberg, N. și Masel, D. (1987). O evaluare a potrivirii încrucișate, HLA și ABO pentru transfuziile de trombocite la pacienții refractari.. Sânge70(1), 23-30.
  5. Arslan, Ö. (2006). Matching electronic. Recenzii despre medicina transfuzionalădouăzeci(1), 75-79.
  6. Wu, K. K., Hoak, J. C., Koepke, J. A. și Thompson, J. S. (1977). Selectarea donatorilor de trombocite compatibili: o evaluare prospectivă a trei tehnici de potrivire încrucișată. Transfuzie17(6), 638-643.
  7. Schonewille, H., Zijl, A. M. V. și Wijermans, P. W. (2003). Importanța anticorpilor împotriva antigenelor RBC cu incidență scăzută în potrivirea încrucișată completă și prescurtată. Transfuzie43(7), 939-944.

Nimeni nu a comentat acest articol încă.