Roșu Congo este un colorant azoic pentru proteine, format prin cuplarea unei sări de diazoniu și a unui inel aromatic activ. Această substanță este capabilă să absoarbă radiația electromagnetică în spectrul vizibil, motiv pentru care are o culoare intensă.
Este încărcat negativ. Prin urmare, are o afinitate pentru componentele celulare încărcate pozitiv, cum ar fi anumite substanțe proteice. Culoarea sa variază în funcție de pH. În acest sens, dacă mediul este acid (< de pH3), el color es azul intenso. Entre pH3 - pH 5,2 es fucsia (zona de viraje), y con >pH 5,2 culoarea este roșu intens.
Este o substanță foarte versatilă, deoarece are multiple utilizări. A fost folosit ca colorant în industria textilă, precum și pentru celule și țesături.
De asemenea, pentru a efectua medii de cultură care măsoară acțiunea enzimatică, ca indicator de pH, ca substanță de control în evaluarea funcționării corecte a spectrofotometrelor, în studiul formării biofilmului sau în diagnosticul de amiloid..
De asemenea, a făcut posibilă distincția serotipurilor bacteriene și fungice prin identificarea structurilor specifice din peretele lor (lipopolizaharide)..
Indice articol
Această substanță a fost descoperită de Böttiger în 1884. Este un derivat al diazoniului format din acidul bis-diazoic al benzidinei cu acidul naftionic. Molecula roșie Congo măsoară 21 Armstrong și greutatea moleculară este de aproximativ 8000 g / mol..
Roșul Congo se caracterizează prin faptul că este solubil în apă și cu atât mai mult în solvenți organici precum etanolul, formând o soluție coloidală.
Are o afinitate pentru celuloză, țesut amiloid și componente celulare încărcate pozitiv.
Roșul Congo este preparat în concentrații diferite, în funcție de tehnica care trebuie utilizată. Majoritatea folosesc roșu Congo la 1%, 2%, 0,1%, printre altele.
De exemplu, pentru a prepara 2% roșu Congo, trebuie cântărite 2 g de colorant alimentar deshidratat și adăugate 100 ml apă distilată. Apoi se păstrează într-o sticlă de chihlimbar.
Pentru o vreme a fost utilizat pe scară largă în industria textilă datorită fixării sale pe bumbac, dar în prezent este în uz, deoarece este cancerigen și, de asemenea, deoarece culoarea nu este stabilă, devenind decolorată de frecare..
S-a dovedit că capacitatea de formare a biofilmului microorganismelor este un factor de virulență.
În acest sens, colorantul roșu Congo este utilizat ca metodă pentru determinarea formării biofilmului. Roșul Congo se leagă de exopolizaharidele prezente în biofilm. Cu toate acestea, în comparație cu alte metode, este cel mai puțin recomandat datorită falsurilor negative ridicate care apar.
Metoda folosește agar roșu Congo, acesta este compus din agar de sânge ca bază, glucoză (10 g / l) și colorant roșu Congo (0,4 g / l). Tulpinile care urmează să fie evaluate sunt însămânțate în mediu și incubate 24 de ore la 37 ° C și ulterior incubate 48 de ore la temperatura camerei..
Un test pozitiv este evidențiat dacă se observă colonii cristaline de culoare neagră și aspect uscat.
Pentru a evalua dacă un echipament de măsurare a absorbanței sau a tranzacțiilor respectă parametrii fotometrici stabiliți de reglementările internaționale, se poate utiliza o tehnică simplă pentru a stabili dacă echipamentul emite rezultate în limitele acceptabilității..
Una dintre tehnicile de evaluare este utilizarea roșu Congo, pe baza punctului izosbestic.
Punctul izosbestic este lungimea de undă la care roșul Congo emite aceeași absorbanță independent de pH, concentrație și temperatură. Valoarea absorbanței este fixă și poate fi utilizată ca referință.
Se știe că punctul izosbestic teoretic al roșu Congo este de 541 nm. Dacă valoarea obținută este diferită, se știe că echipamentul are probleme cu deriva în lungimea de undă și trebuie verificat de un tehnician specializat..
Ortiz și colab. Descrieți un mediu de cultură preparat cu colorant roșu Congo și carboximetilceluloză numit agar CMC, pentru a detecta tulpini microbiene de celulită; adică producători de celulază (endogluconese, exoglucanaze și ß-glucozidază).
Acest mediu are o colorare intensă. Culoarea va fi disipată prin acțiunea enzimei endoglucanazei care rupe structura carboximetilcelulozei. Acest lucru sugerează o reacție pozitivă.
Scăderea vâscozității și absorbanței permite cuantificarea activității enzimei. De exemplu, în tulpini de Streptomyces sp.
Roșul Congo are o afinitate pentru structurile polizaharidice ale anumitor tulpini, realizând identificarea acestor microorganisme. Printre acestea se numără Escherichia coli, si Shigella flexneri.
Plăcile de agar roșu din Congo sunt, de asemenea, utilizate pentru a obține colonii caracteristice, cum este cazul Azospirillum sp, dând colonii roșii stacojii, printre altele.
Una dintre cele mai frecvente aplicații ale roșu Congo este utilitatea sa în diagnosticul de amiloidoză. Această boală ciudată constă în acumularea extracelulară a unei proteine anormale în diferite organe. Această proteină anormală se produce în măduva osoasă și se numește amiloid..
Roșul Congo are o afinitate mare pentru această substanță. Această proprietate a fost utilizată pentru a-și arăta prezența în secțiuni de țesut histologic. Roșul Congo este utilizat în asociere cu hematoxilină / eozină în acest scop..
Unirea țesutului amiloid și a roșului Congo se produce prin legături de hidrogen nepolare, între grupările carboxil și gruparea amino. Proteina amiloidă furnizează grupările carboxil (COOH), iar Congo roșu grupa amino.
Țesutul amiloid este colorat în diferite nuanțe, de la roz până la roșu intens la microscopul cu lumină. La microscoapele cu lumină dublu polarizată, aceste preparate sunt observate cu o birrefringență patognomonică verde-măr..
Adică prezintă dicroism, deoarece fibrele ameloide sunt anizotrope. Această observație confirmă diagnosticul.
Colorarea țesutului cu roșu Congo este compatibilă cu alte metodologii de diagnostic, cum ar fi metodele imunocitochimice și este chiar posibil să se recoloreze.
Proprietatea de a vă întoarce împotriva modificărilor pH-ului este utilizată de tehnica numită cromoendoscopie..
Această tehnică folosește coloranți și indicatori de pH care permit detectarea anumitor patologii. Printre acestea se numără utilizarea roșu Congo, care poate dezvălui focare precoce ale cancerului în mucoasa gastrică, fiind utilizat ca marker al acidității.
Tehnica se bazează pe faptul că roșul Congo la pH acid este negru. Prin urmare, după plasarea unei soluții de roșu Congo pe mucoasa gastrică, zonele în care există paloare vor fi alese pentru prelevarea probei pentru biopsie, adică în care nu există producție de acid. Acest lucru sugerează prezența unui focar canceros sau pierderea celulelor parietale..
Nimeni nu a comentat acest articol încă.