Agar BHI Agarul de infuzie a inimii cerebrale este un mediu de cultură solid nutritiv. În spaniolă ne referim la aceasta ca agar de infuzie a inimii creierului. Este un mediu de cultură neselectiv, ceea ce înseamnă că se pot dezvolta toate tipurile de bacterii Gram pozitive și Gram negative, precum și unele drojdii și ciuperci filamentoase..
Este compus dintr-o infuzie de carne de vită creier și inimă, hidrolizat peptic din țesuturile animale, hidrolizat pancreatic de cazeină, clorură de sodiu, glucoză, fosfat disodic și agar..
Trebuie remarcat faptul că agarul BHI este unul dintre cele mai utilizate medii de cultură în laboratoarele de bacteriologie. Poate fi utilizat fără suplimente ca cultură primară, subcultură de colonii obținute pe alte medii selective sau pentru întreținerea tulpinilor în laborator.
Pe de altă parte, este un mediu ideal pentru a fi utilizat ca bază în prepararea mediilor îmbogățite, cum ar fi agar de sânge și agar de ciocolată. Ambele sunt ideale pentru izolarea microorganismelor solicitante din punct de vedere nutrițional. Cu toate acestea, trebuie remarcat faptul că, deoarece conține glucoză, nu este potrivit pentru observarea modelelor de hemoliză..
În mod similar, agar BHI poate fi utilizat pentru prepararea mediilor speciale pentru izolarea microorganismelor patogene dificil de cultivat în mediile comune, inclusiv: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae și Histoplasma capsulatum.
Cu aditivul antibiotic, agarul BHI devine un mediu selectiv pentru izolarea ciupercilor.
Indice articol
Este un mediu de cultură nutritiv pentru izolarea microorganismelor cu cerințe moderate, iar îmbogățirea acestuia poate fi crescută prin adăugarea de sânge și alte suplimente nutritive..
Este un mediu de cultură neselectiv, prin urmare permite creșterea majorității bacteriilor Gram pozitive și Gram negative, precum și a unor ciuperci. Cu toate acestea, poate deveni selectiv prin adăugarea de antibiotice..
Mediul conține perfuzie de creier și inimă de vită, hidrolizat peptic de țesut animal și hidrolizat de cazeină pancreatică; toți acești compuși acționează ca surse de vitamine, aminoacizi, azot și carbon.
Glucoza este un carbohidrat care furnizează energie microorganismelor odată ce au fermentat-o. Între timp, clorura de sodiu și fosfatul disodic mențin echilibrul osmotic și oferă un pH apropiat de neutralitate. În cele din urmă, agarul conferă consistenței solide mediului.
Se cântăresc 52 de grame de mediu deshidratat și se dizolvă într-un litru de apă distilată. Aduceți amestecul la o sursă de căldură până la fierbere, amestecând frecvent în timpul procesului de dizolvare..
Plăcile sau panele de agar BHI pot fi preparate fără aditivi.
Pentru prepararea penei, serviți preparatul până când jumătate din fiecare tub se umple, acoperiți și sterilizați într-o autoclavă la 121 ° C timp de 15 minute, la plecare, așezați-vă pe o bază până se solidifică. Păstrați mai târziu la frigider până la utilizare.
Amestecul dizolvat este autoclavizat la 121 ° C timp de 15 minute, la ieșire se lasă să se răcească la 50 ° C și 20 ml de mediu sunt serviți în cutii Petri sterile. Se lasă să se solidifice, sunt inversate și depozitate în frigider până la utilizare. Lăsați plăcile să ajungă la temperatura camerei înainte de însămânțare.
PH-ul mediului trebuie să rămână la 7,4 ± 0,2.
Mediul nepregătit este de culoare bej și preparat este de culoare chihlimbar deschis.
După sterilizarea mediului, se răcește la o temperatură de aproximativ 45 până la 50 ° C, apoi se adaugă sângele (50 ml), se amestecă ușor pentru a se omogeniza și se servesc aseptic 20 ml în fiecare cutie Petri. Dacă se formează bule pe farfurie, flacăra mai ușoară trebuie trecută rapid peste bule pentru a le elimina.
De asemenea, se pot pregăti medii speciale prin adăugarea aditivilor corespunzători atunci când amestecul atinge o temperatură de 45 până la 50 ° C..
Mijlocul este roșu cireș.
Agarul BHI fără aditivi este util ca cultură primară și pentru însămânțarea tulpinilor pure de microorganisme cu solicitare mică sau medie pentru identificarea lor ulterioară..
Deoarece este un mediu deschis la culoare, este ideal pentru observarea pigmenților și, deoarece nu conține substanțe care interferează, pot fi efectuate unele teste biochimice, cum ar fi oxidaza și catalaza, sau alte teste biochimice pot fi montate din colonii din acest agar.
La fel, pene de agar BHI sunt utilizate pe scară largă pentru întreținerea tulpinilor pentru un anumit timp în laborator (bacteriotecă).
Plăcile însămânțate la suprafață sau pene cu tulpini bacteriene sunt incubate la 37 ° C timp de 24 până la 48 de ore. În timp ce, în ciuperci, temperatura și timpul de incubație vor depinde de tipul de ciupercă căutat..
Cu această bază puteți pregăti suporturi îmbogățite și selective.
Funcția sa principală este de a servi ca bază în prepararea agarului de sânge pentru utilizarea de rutină în laboratoarele de microbiologie. În special, baza BHI este propice izolării tulpinilor de Streptococ sp. Cu toate acestea, are dezavantajul de a nu fi potrivit pentru observarea modelelor de hemoliză, deoarece conține glucoză..
Este, de asemenea, utilizat la prepararea agarului de sânge de iepure sau de cal pentru izolarea Haemophilus sp. Pentru rezultate mai bune, se poate adăuga un supliment de îmbogățire (IsoVitaleX).
Dacă probele provin din căile respiratorii către agar, se poate adăuga bacitracină pentru a inhiba flora însoțitoare și pentru a crește probabilitatea de recuperare a tulpinilor de Haemophilus sp.
Pe de altă parte, agarul de sânge (miel sau om) cu telurit de cistină poate fi pregătit pentru a se izola Corynebacterium diphtheriae. De asemenea, este util să preparați agar din sânge de iepure, cu adăugarea de cistină și glucoză pentru izolarea Francisella tularensis.
Plăcile de agar din sânge sunt semănate prin epuizare și sunt incubate la 35-37 ° C timp de 24-48 de ore în microaerofilicitate (5-10% CODouă).
Acest mediu cu adăugarea de antibiotice poate înlocui agar Sabouraud pentru izolarea ciupercilor..
Combinația de agar BHI cu cloramfenicol - gentamicină sau penicilină -, streptomicină și sânge de cal este ideală pentru izolarea Histoplasma capsulatum.
În funcție de microorganismul care urmează să fie izolat, se recomandă incubația la 35-37 ° C sau la temperatura camerei în aerobioză. Uneori incubarea este necesară în ambele domenii de temperatură, folosind 2 plăci pentru aceasta..
Unelor ciuperci le place Trichophyton mentagrophytes trebuie incubat la temperatura camerei timp de până la 7 zile.
Din fiecare lot pregătit, se recomandă incubarea a 1 placă sau pană la 37 ° C timp de 24 de ore și verificarea faptului că nu există creștere; este deosebit de important atunci când preparați agar de sânge, deoarece este un mediu ușor de contaminat.
Pe de altă parte, calitatea mediului poate fi evaluată prin inocularea tulpinilor standard cunoscute sau certificate și prin observarea dezvoltării acestora..
În acest sens, pentru a evalua agar BHI fără aditivi, tulpini de Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 sau Candida albicans ATCC 10231. Incubați la 37 ° C în aerobioză timp de 24 până la 48 de ore. În toate cazurile este de așteptat o creștere satisfăcătoare.
Pentru a evalua plăcile de agar din sânge, tulpinile de Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 sau Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.
Tulpinile bacteriene sunt incubate la 37 ° C în microaerofilicitate timp de 24 de ore, în timp ce ciuperca este incubată la temperatura camerei într-o cameră umedă timp de până la 7 zile. În toate cazurile este de așteptat o creștere satisfăcătoare.
Nimeni nu a comentat acest articol încă.