Agar Vogel-Johnson este un mediu de cultură solid, selectiv și diferențial, special formulat pentru izolarea Staphylococcus aureus. Acest mediu a fost creat de Vogel și Johnson în 1960 din modificarea agarului de glicină telurit formulată în 1955 de Zebovitz, Evans și Niven..
Modificarea a constat în creșterea concentrației de manitol prezent în mediu și în încorporarea unui indicator de pH. Formula actuală este compusă din tripteină, extract de drojdie, manitol, fosfat dipotasic, clorură de litiu, glicină, roșu fenol, agar, soluție de telurit de potasiu 1% și apă..
Trebuie remarcat faptul că există alte mijloace de comunicare care, cum ar fi agar Vogel-Johnson, sunt selective pentru izolarea S. aureus, precum agar de manitol sărat și agar de Baird Parker. În acest sens, s-ar putea spune că baza de agar Vogel-Johnson este un amestec între agar de manitol sărat și agar de Baird Parker..
În prima coloniile din S. aureus Se disting prin fermentarea manitolului și transformarea indicatorului pH-ului în galben. Pe de altă parte, în a doua, S. aureus se caracterizează prin reducerea teluritului la telur și formarea coloniilor cenușii spre negre. Ambele proprietăți sunt observate în agarul Vogel-Johnson..
Acest mediu, ca și omologii săi, este util pentru detectarea Staphylococcus aureus în probe alimentare, controale sanitare ale produselor industriale și în probe clinice.
Indice articol
Mediul Vogel-Johnson conține extract de tripteină și drojdie; Ambele substanțe furnizează aminoacizi cu lanț lung care servesc drept surse de carbon și azot necesare pentru dezvoltarea bacteriilor. Bacteriile capabile să crească în acest mediu vor prelua nutrienții din aceste substanțe..
Agarul Vogel-Johnson este capabil să inhibe creșterea bacteriilor Gram negative și chiar a unor bacterii Gram pozitive, favorizând dezvoltarea stafilococilor coagulazici pozitivi. Substanțele inhibitoare sunt teluritul de potasiu, clorura de litiu și glicina..
Substanțele care fac acest mediu diferențial sunt manitolul și teluritul de potasiu. Manitolul este un carbohidrat, iar atunci când este fermentat, se produc acizi care fac ca mediul să se transforme de la roșu la galben, ceea ce se întâmplă datorită prezenței indicatorului de pH al fenolului roșu..
În timp ce, teluritul incolor, atunci când este redus la telur metalic liber, ia o culoare gri închis la negru..
Staphylococcus aureus fermentează manitolul și reduce teluritul în telur. De aceea coloniile tipice din S. aureus în acest mediu sunt gri sau negru înconjurați de un mediu galben.
Bacteriile care cresc în acest mediu și nu reduc teluritul sau fermentează manitolul, vor forma colonii transparente înconjurate de un mediu de culoare roșie, chiar mai intens decât culoarea originală, datorită alcalinizării mediului prin utilizarea peptonelor.
Pe de altă parte, bacteriile care reduc teluritul, dar nu fermentează manitolul, vor crește sub formă de colonii gri sau negre înconjurate de un mediu roșu intens..
Dacă mediul a fost preparat fără adăugarea de telurit de potasiu, coloniile de S. aureus s-ar dezvolta ca colonii galbene, înconjurate de un mediu galben, ca în agarul manitol sărat.
Fosfatul dipotasiic menține echilibrul osmotic al mediului și ajustează pH-ul la neutralitate 7.2. În timp ce agarul conferă consistenței solide mediului de cultură.
Această soluție nu este inclusă în mediul deshidratat, deoarece nu poate fi sterilizată în autoclavă. Din acest motiv, se prepară separat și se adaugă la mediul deja sterilizat..
Unele case comerciale vând soluția de telurit de potasiu gata de utilizare 1%. Dacă doriți să vă pregătiți în laborator, procedați după cum urmează:
Se cântăresc 1,0 g de telurit de potasiu și se măsoară 100 ml de apă distilată. Se dizolvă teluritul de potasiu într-o parte din apă și apoi se completează cantitatea de apă până la 100 ml. Sterilizați soluția prin metoda de filtrare.
Se cântăresc 60 g de mediu deshidratat și se dizolvă în 1 litru de apă distilată. Amestecul este încălzit până la fierbere pentru a ajuta la dizolvarea completă. În timpul procesului de dizolvare, mediul este agitat frecvent.
Sterilizați în autoclavă la o presiune de 15 kilograme și 121 ° C timp de 15 minute. Se scoate din autoclavă și se lasă să se odihnească până când mediul atinge o temperatură de aproximativ 45 până la 50 ° C. Se adaugă 20 ml din soluția de telurit de potasiu preparată anterior 1%.
Se amestecă și se toarnă în vase Petri sterile. Lăsați să se solidifice și comandați inversat pe suporturile pentru plăci pentru a le păstra ulterior în frigider până la utilizare.
PH-ul final al mediului preparat trebuie să fie de 7,2 ± 0,2.
Înainte de a semăna o probă, așteptați ca placa să atingă temperatura camerei..
Culoarea mediului pregătit este roșu.
Deși poate fi folosit pentru izolarea S. aureus în orice tip de probe, este utilizat în principal pentru analiza microbiologică a produselor farmaceutice, a produselor cosmetice și a produselor alimentare.
Se recomandă ca inoculul să fie dens. Semănatul se poate face prin striație cu un mâner de platină sau prin suprafață cu o spatulă Drigalski.
Plăcile sunt incubate la 35-37 ° C timp de 24 până la 48 de ore în aerobioză.
Următoarele tulpini de control pot fi utilizate pentru a efectua controlul calității pe mediul Vogel-Johnson:
Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Stafilococ epidermid ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 sau Proteus mirabilis ATCC 43071.
Rezultatul așteptat este următorul: pentru tulpinile de S. aureus Creștere satisfăcătoare cu colonii negre înconjurate de mediu galben. Pentru a S. epidermidis creștere regulată cu colonii translucide sau negre înconjurate de mediu roșu.
La fel, pentru E coli se așteaptă o inhibiție totală și pentru Proteus mirabilis inhibiție parțială sau totală; dacă va crește, o va face cu ușurință și coloniile vor fi negre înconjurate de jumătate roșie.
Nimeni nu a comentat acest articol încă.