bulion de soia triptic Este un mediu de cultură lichid, foarte hrănitor și neselectiv. Datorită versatilității sale mari, este unul dintre cele mai utilizate medii de cultură lichidă din laboratorul de microbiologie..
Este, de asemenea, cunoscut sub numele de bulion de soia triptic sau bulion digerat de cazeină-soia, a cărui prescurtare este TSB pentru acronimul său în limba engleză. Triptic am Bulion sau CST pentru acronimul său în spaniolă. Utilizările sale sunt foarte variate datorită compoziției sale. Este compus din tripteină, peptonă de soia, clorură de sodiu, fosfat dipotasic și glucoză.
Este capabil să reproducă bacterii patogene importante din punct de vedere clinic, inclusiv pe cele care necesită nutriție și bacterii anaerobe. Unele ciuperci oportuniste și contaminante se pot dezvolta și în acest mediu.
Datorită puterii sale nutritive ridicate, are o sensibilitate ridicată pentru a detecta contaminarea microbiană, din acest motiv a fost ales de Serviciul USDA de inspecție a sănătății animalelor și plantelor pentru analiza microbiologică a vaccinurilor..
La fel, bulionul de soia tripticaseină îndeplinește cerințele diferitelor farmacopee (EP european, JP japonez și USP nord-american) pentru studiul microbiologic al produselor la nivel industrial, cum ar fi produsele cosmetice și alimentele..
Pe de altă parte, merită menționat faptul că, în ciuda utilității sale mari, acest mediu este relativ ieftin, ceea ce îl face accesibil pentru majoritatea laboratoarelor de microbiologie. De asemenea, este foarte ușor de pregătit.
Indice articol
Tripteina, peptona și glucoza oferă proprietăți nutriționale esențiale pentru a face din acesta un mediu ideal pentru o creștere rapidă microbiană.
În aproximativ 6 până la 8 ore de incubație, creșterea poate fi deja observată în majoritatea microorganismelor. Cu toate acestea, există tulpini cu creștere lentă, care pot dura zile să crească..
Clorura de sodiu și fosfatul dipotasic acționează ca echilibru osmotic și, respectiv, regulator de pH. Prezența creșterii este evidențiată de apariția turbidității în mediu; dacă nu există creștere, mediul rămâne translucid.
Datorită culorii sale deschise, este posibil să se observe producția de pigmenți, cum ar fi cea prezentată în imaginea situată la începutul articolului, care corespunde pigmentului produs de Pseudomonas aeruginosa.
Pentru a prepara bulion de soia tripticază, 30 g de mediu comercial deshidratat trebuie cântărite pe o cântare digitală. Apoi se dizolvă într-un litru de apă distilată conținută într-un balon.
Amestecul este lăsat să se odihnească timp de 5 minute și apoi este dus la o sursă de căldură pentru a ajuta la dizolvarea mediului. Ar trebui amestecat frecvent în timp ce fierbe timp de 1 minut.
Odată dizolvat, acesta este distribuit în tuburi de dimensiunea adecvată, după cum este necesar. Se pot folosi tuburi cu dopuri de bumbac sau cu capace din bakelită. Ulterior, tuburile sunt sterilizate cu mediu în autoclavă la 121 ° C timp de 15 minute..
PH-ul mediului trebuie să rămână la 7,3 ± 0,2
Trebuie remarcat faptul că culoarea mediului de cultură deshidratat este bej deschis și trebuie păstrată între 10 și 35 ° C, într-un loc uscat. În timp ce bulionul preparat are culoarea chihlimbar deschis și trebuie păstrat la frigider (2 până la 8 ° C).
Bulionul de soia cu tripticaseină modificată poate fi preparat prin adăugarea de săruri biliare și novobiocină pentru ao face selectiv pentru izolarea E coli. O altă opțiune în același scop este prepararea bulionului de soia tripticază suplimentat cu vancomicină, cefiximă și telurit (2,5 µg / ml)..
Pe de altă parte, mai multă glucoză (0,25%) poate fi adăugată bulionului de soia triptic atunci când obiectivul este de a stimula formarea de biofilme..
Este suficient de nutritiv pentru a permite dezvoltarea bacteriilor fastidioase sau fastidioase, cum ar fi Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp și Brucella sp, nu este nevoie să suplimentați cu sânge sau ser.
La fel, unele ciuperci se pot dezvolta în acest bulion, cum ar fi Complexul Candida albicans, Aspergillus sp și Histoplasma capsulatum.
În plus, acest mediu în condiții anaerobe este ideal pentru recuperarea bacteriilor aparținând genului Clostridium, precum și a bacteriilor anaerobe nesporulate de importanță clinică..
Dacă se adaugă 6,5% clorură de sodiu, aceasta poate fi utilizată pentru creșterea enterococului și a altor streptococi din grupa D..
La nivel de cercetare, a fost foarte util în diverse protocoale, în special în studiul biofilmului sau bacteriilor care formează biofilm. Este, de asemenea, utilizat pentru a prepara suspensia bacteriană Mac Farland de 0,5% necesară pentru efectuarea antibiogramei prin metoda Kirby și Bauer..
În acest caz, 3 până la 5 colonii cu aspect similar sunt luate și emulsionate în 4-5 ml de bulion de soia tripticaseină. Apoi este incubat timp de 2 până la 6 ore la 35-37 ° C și ulterior ajustat la concentrația dorită folosind ser fiziologic steril. Bulburile de soia tripticaseină nu trebuie utilizate între 18 și 24 de ore de incubație.
Proba poate fi însămânțată direct sau coloniile pure prelevate din medii selective pot fi subculturate. Inoculul trebuie să fie mic, astfel încât să nu înnorăm mediul înainte de incubare.
În mod normal, este incubat la 37 ° C în aerobioză timp de 24 de ore, dar aceste condiții pot varia în funcție de microorganismul căutat. De asemenea, poate fi incubat în condiții anaerobe la 37 ° C timp de câteva zile, dacă este necesar. De exemplu, în microorganisme fastidioase sau cu creștere lentă, acesta poate fi incubat până la 7 zile.
În analiza microbiologică a substanțelor farmaceutice - cum ar fi vaccinurile - protocoalele sunt mai stricte. În aceste cazuri, bulionul fără creștere nu este aruncat până când nu ajunge la 14 zile de incubație continuă..
Din fiecare lot pregătit, 1 sau 2 tuburi neinoculate trebuie incubate pentru a demonstra sterilitatea lor. Trebuie să rămână neschimbat.
Tulpinile cunoscute pot fi, de asemenea, plantate pentru a le evalua comportamentul. Printre tulpinile care pot fi utilizate se numără:
Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 sau 25923, Escherichia coli ATCC 8739, Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.
În toate cazurile, creșterea trebuie să fie satisfăcătoare în condițiile atmosferei și temperaturii adecvate pentru fiecare microorganism..
-Fermentarea glucozei determină scăderea pH-ului mediului datorită producției de acizi. Acest lucru poate fi nefavorabil pentru supraviețuirea unor microorganisme sensibile la aciditate..
-Nu este recomandat pentru întreținerea tulpinilor, deoarece, pe lângă aciditate, bacteriile epuizează substanțele nutritive după câteva zile cu acumularea consecventă de substanțe toxice care fac mediul inospitalier.
-Trebuie să lucrați având grijă de toate protocoalele de sterilitate, deoarece bulionele sunt ușor de contaminat.
-După pregătirea bulionelor de soia tripticaseină, nu trebuie să încercați să transferați bulionul într-un alt tub steril, deoarece acest tip de manevră este foarte vulnerabil la contaminare..
Nimeni nu a comentat acest articol încă.