nefelometrie constă în măsurarea radiației cauzate de particule (în soluție sau în suspensie), măsurând astfel puterea radiației împrăștiate la un alt unghi decât direcția radiației incidente.
Când o particulă suspendată este lovită de un fascicul de lumină, există o porțiune a luminii care este reflectată, o altă porțiune este absorbită, o altă parte este deviată, iar restul este transmis. Acesta este motivul pentru care atunci când lumina lovește un mediu transparent în care există o suspensie de particule solide, suspensia apare tulbure..
Indice articol
În momentul în care un fascicul de lumină lovește particulele unei substanțe în suspensie, direcția de propagare a fasciculului își schimbă direcția. Acest efect depinde de următoarele aspecte:
1. Dimensiuni ale particulei (dimensiune și formă).
2. Caracteristicile suspensiei (concentrație).
3. Lungimea de undă și intensitatea luminii.
4. Distanță de lumină incidentă.
5. unghiul de detecție.
6. Indicele de refracție al mediului.
Nefelometrul este un instrument utilizat pentru măsurarea particulelor suspendate într-o probă lichidă sau într-un gaz. Deci, o fotocelulă plasată la un unghi de 90 ° față de o sursă de lumină detectează radiațiile din particulele prezente în suspensie..
De asemenea, lumina reflectată de particule către fotocelulă depinde de densitatea particulelor. Diagrama 1 prezintă componentele de bază care alcătuiesc un nefelometru:
În nefelometrie este de o importanță vitală să ai o sursă de radiații cu o lumină mare. Există diferite tipuri, de la lămpi cu xenon și lămpi cu vapori de mercur, lămpi cu halogen de tungsten, radiații laser, printre altele..
Acest sistem este situat între sursa de radiație și cuvetă, astfel încât în acest fel radiația cu lungimi de undă diferite în comparație cu radiația dorită este evitată pe cuvetă..
În caz contrar, reacțiile de fluorescență sau efectele de încălzire din soluție ar provoca abateri de la măsurare..
Este un recipient în general prismatic sau cilindric și poate avea dimensiuni diferite. În aceasta veți găsi soluția în studiu.
Detectorul este situat la o distanță specifică (în general foarte aproape de cuvetă) și este responsabil de detectarea radiației împrăștiate de particulele din suspensie..
În general, este o mașină electronică care primește, convertește și procesează date, care în acest caz sunt măsurătorile obținute în urma studiului efectuat..
Fiecare măsurare este supusă unui procent de eroare, care este dat în principal de:
Cuve contaminate: în cuve, orice agent extern soluției în studiu, indiferent dacă este în interiorul sau în exteriorul cuvei, reduce lumina radiantă pe drumul către detector (cuve defecte, praf care aderă la pereții cuvei).
Interferență: prezența unor contaminanți microbieni sau turbiditate dispersează energia radiantă, crescând intensitatea dispersiei.
Compuși fluorescenți: aceștia sunt acei compuși care, atunci când sunt excitați de radiații incidente, determină citiri eronate și cu densitate mare de împrăștiere.
Depozitarea reactivilor: temperatura incorectă a sistemului ar putea provoca condiții de studiu nefavorabile și ar incita prezența reactivilor tulburi sau precipitați.
Fluctuații ale puterii electrice: pentru a preveni radiația incidentă de a fi o sursă de eroare, stabilizatorii de tensiune sunt recomandați pentru radiații uniforme.
Deoarece puterea radiantă a radiației detectate este direct proporțională cu concentrația de masă a particulelor, studiile nefelometrice au - în teorie - o sensibilitate metrologică mai mare decât alte metode similare (cum ar fi turbidimetria).
În plus, această tehnică necesită soluții diluate. Acest lucru permite minimizarea atât a fenomenelor de absorbție, cât și de reflexie..
Studiile nefelometrice ocupă o poziție foarte importantă în laboratoarele clinice. Aplicațiile variază de la determinarea imunoglobulinelor și proteinelor de fază acută, a complementului și a coagulării.
Când o probă biologică conține un antigen de interes, aceasta este amestecată (într-o soluție tampon) cu un anticorp pentru a forma un complex imunitar..
Nefelometria măsoară cantitatea de lumină care este împrăștiată de reacția antigen-anticorp (Ag-Ac) și, în acest fel, sunt detectați complexele imune.
Acest studiu poate fi realizat prin două metode:
Această tehnică poate fi utilizată pentru analiza punctului final, în care anticorpul probei biologice studiate este incubat timp de douăzeci și patru de ore..
Complexul Ag-Ac este măsurat folosind un nefelometru și cantitatea de lumină împrăștiată este comparată cu aceeași măsurătoare efectuată înainte de formarea complexului..
În această metodă, rata de formare a complexului este monitorizată continuu. Viteza de reacție depinde de concentrația antigenului din probă. Aici măsurătorile sunt luate în funcție de timp, deci prima măsurare se face la momentul "zero" (t = 0).
Nefelometria cinetică este cea mai utilizată tehnică, deoarece studiul poate fi realizat în 1 oră, comparativ cu perioada lungă de timp a metodei punctului final. Raportul de dispersie este măsurat imediat după adăugarea reactivului.
Prin urmare, atâta timp cât reactivul este constant, cantitatea de antigen prezent este considerată direct proporțională cu rata de schimbare.
Nefelometria este utilizată în general în analiza calității chimice a apei, pentru a determina claritatea și pentru a controla procesele sale de tratare..
Este, de asemenea, utilizat pentru a măsura poluarea aerului, în care concentrația particulelor este determinată de dispersia pe care o produc într-o lumină incidentă..
Nimeni nu a comentat acest articol încă.