ansa bacteriologica Este un instrument de lucru folosit de microbiologi pentru însămânțarea culturilor microbiene (bacterii sau ciuperci). Este probabil instrumentul cel mai folosit de acești profesioniști.
Utilizarea acestuia pare simplă, dar în realitate necesită multă pregătire. Înainte de a începe însămânțarea, bucla trebuie sterilizată în arzătorul Bunsen, apoi se ia inoculul microbian care poate proveni dintr-o cultură lichidă sau dintr-o cultură solidă..
Odată ce inoculul a fost luat, acesta poate fi depus într-un mediu lichid sau însămânțat într-un mediu solid. După fiecare procedură, bucla este sterilizată din nou. Mânerul servește, de asemenea, pentru a face frotiuri microbiene pe o lamă.
Bucla bacteriologică are multe denumiri, inclusiv: buclă sau buclă de platină, buclă de inoculare sau buclă de însămânțare, totuși numele său real este bucla Kohle..
Materialul cu care este realizat mânerul este, în general, un aliaj de nichel-crom (nicrom) sau, de asemenea, platină. O altă varietate disponibilă pe piață sunt buclele bacteriologice de unică folosință din plastic..
Pe de altă parte, există mai multe tipuri de bucle bacteriologice, fiecare îndeplinind o funcție în cadrul sarcinilor efectuate de un microbiolog. Alegerea mânerului va depinde de ceea ce trebuie făcut.
De exemplu, pentru a efectua un striat din cauza epuizării pentru a izola un microorganism, se folosește bucla de platină care se termină într-un inel închis, indiferent dacă este calibrată sau nu..
În timp ce, pentru a semăna o probă de urină, unde este important să se cuantifice CFU-uri, este necesar să se utilizeze bucla calibrată. La fel, pentru a inocula teste biochimice, care necesită să fie semănate prin puncție, bucla acului este esențială. Este important ca mânerul să fie manipulat de personal instruit.
Indice articol
Buclele bacteriologice sunt formate din două extreme. Un capăt corespunde mânerului sau bazei, în timp ce celălalt este mânerul în sine.
Baza servește la prinderea mânerului în timpul manipulării. De obicei este metalic, dar are un izolator termic pentru a preveni arderea operatorului atunci când vârful mânerului este sterilizat pe brichetă. Măsoară aproximativ 20 cm, deși poate fi mai lung. Are un fir pentru reglarea mânerului.
Este capătul funcțional, adică este partea care intră în contact cu microorganismele și cu mediile de cultură. Se compune dintr-un fir fin care se introduce în bază.
Mânerul poate fi realizat din nicrom sau platină, de aceea este uneori numit mâner de platină. Are o lungime de aproximativ 6,5 cm și un ecartament de aproximativ 0,20 mm. Mânerul cu mânerul poate măsura 26,5 cm. Măsurătorile pot varia de la producător la producător.
Există mai multe tipuri de bucle bacteriologice și fiecare are o utilizare specifică. Tipurile de mânere sunt după cum urmează: mâner calibrat în formă de inel, mâner non-calibrat în formă de inel, mâner drept sau ac, mâner spatulat, mâner în formă de „L” și mâner cu vârf ascuțit.
Pe de altă parte, mânerele pot fi permanente sau de unică folosință. Cele pentru uz permanent sunt sterilizate în brichetă, fiind reutilizabile și foarte durabile. În timp ce produsele de unică folosință sunt sterile din fabrică, acestea sunt utilizate o singură dată și sunt aruncate..
Este cel mai folosit mâner din laboratorul de microbiologie. Se folosește pentru a lua un inocul dintr-o suspensie microbiană (mediu lichid) sau o porțiune de colonie (mediu solid), pentru a fi însămânțat într-un alt mediu de cultură, fie un test biochimic, fie un mediu mai îmbogățit sau selectiv, după caz . De asemenea, util pentru a face frotiuri microbiene pe o lamă.
Cu acest tip de buclă, inoculul inițial poate fi dungat. De asemenea, este proiectat astfel încât să alunece lin pe agar, fără a-l deteriora. Desigur, acest lucru necesită un personal instruit care să se ocupe de tehnica de însămânțare, aplicând forța și mișcările corecte pentru a face o striație bună..
Cu acest mâner se pot efectua diverse tehnici de însămânțare. Exemplu, mediile solide din vasele Petri sunt de obicei însămânțate prin epuizare (există mai multe tehnici, vezi videoclipul 1).
Această tehnică își propune să obțină colonii izolate pentru a le putea studia și identifica, mai ales atunci când proba este polimicrobiană, adică cultura nu este pură (conține mai mult de un tip de microorganism)..
În schimb, pene sunt plantate într-un zigzag simplu pentru a obține masa bacteriană, nefiind necesar în acest caz izolarea coloniilor.
Uneori sunt folosite și pentru prelevarea anumitor probe. De exemplu, Rojas și colab. Au folosit bucla bacteriologică pentru a colecta probe de țesut vaginal răzuite de la șobolani..
Acest mâner, după cum sugerează și numele său, este calibrat pentru a lua o cantitate specifică de suspensie microbiană. Se folosește atunci când este necesar ca inoculul să respecte ceea ce este standardizat în tehnică.
De exemplu, este foarte frecvent pentru plantarea uroculturilor. În acest caz, poate fi utilizată o buclă calibrată de 0,01 ml și una de 0,001 ml..
Trebuie remarcat faptul că mânerele calibrate au o marjă de eroare, care variază în funcție de unghiul cu care este prelevată proba și de mărimea gurii recipientului..
Dacă mânerul de 0,001 ml este introdus vertical într-un recipient cu gura mică (≤ 7 mm), cantitatea luată va fi cu 50% mai mică decât dorită.
Acest lucru se întâmplă deoarece cu cât diametrul gurii recipientului este mai mic, cu atât tensiunea superficială este mai mare și, prin urmare, forțele de aderență dintre (sticlă - lichid) cresc. Acest lucru face ca sarcina lichidă preluată de mâner să fie mai mică.
În timp ce, dacă este luat la un unghi de 45 ° într-un recipient cu gura largă (≥ 22 mm), se poate colecta cu 150% mai mult decât cantitatea necesară. În acest caz, tensiunea superficială este mai mică și forțele de coeziune sticlă / plastic scad, în timp ce forța de coeziune lichid-lichid crește..
Datorită celor de mai sus, alte metode pentru cuantificarea unităților care formează colonii sunt uneori preferate pentru culturile de urină..
Se mai numește și mâner cu fir. Este folosit pentru a inocula anumite teste biochimice, în special cele care necesită să fie însămânțate prin tehnica de puncție. De exemplu, medii semi-solide care sunt preparate sub formă de bloc, cum ar fi: mediu SIM, MIO și O / F.
În plus, în cazul MIO și SIM care evaluează motilitatea, este esențial ca puncția să fie efectuată cu o buclă de ac, deoarece interpretarea unei motilități pozitive are loc atunci când bacteriile cresc spre părțile laterale ale inoculului inițial..
Un test inoculat cu o buclă buclă poate falsifica rezultatele (fals pozitiv). Din acest motiv, în acest tip de însămânțare, trebuie să se aibă grijă ca puncția să fie unică și, atunci când o scoate, să iasă în aceeași direcție în care a intrat.
Un alt test care ar trebui să fie însămânțat cu ac, chiar dacă este pregătit în formă de pană este Kligler. În acest test nu este recomandat ca oxigenul să pătrundă adânc în agar, deoarece este necesar un mediu sărac în oxigen pentru a se produce anumite reacții chimice. Acest mâner este, de asemenea, utilizat pentru a atinge o anumită colonie pentru a subcultura.
Majoritatea microorganismelor dau colonii moi, ușor de aruncat. Cu toate acestea, există unii agenți microbieni ale căror colonii sunt dure și uscate, de exemplu, micobacteriile în general și unele ciuperci. În aceste cazuri este util să folosiți mânerul spatulat.
Cea mai frecventă utilizare a acestuia este de a suna culturile fungice, în special mucegaiurile..
Este util pentru a lua colonii foarte mici prezente în culturi polimicrobiene, pentru a le putea subcultura.
Mânerul trebuie sterilizat înainte și după utilizare. Pentru a steriliza bucla bacteriologică în brichetă, procedați după cum urmează: mânerul trebuie așezat în partea de sus a flăcării, adoptând o poziție cât mai verticală posibil, astfel încât să se sterilizeze de la vârf în sus..
Când filamentul fin devine roșu aprins, se poate spune că este steril. Pentru a-l utiliza, este răcit și se ia proba aleasă. (Vezi videoclipul 2).
Nimeni nu a comentat acest articol încă.