medium Stuart Este un agar semisolid sau un bulion fără substanțe nutritive, folosit pentru transportul probelor biologice. Scopul său este de a menține viabile tulpinile prezente în probă pentru un anumit timp, dar fără a crește populația microbiană.
A fost creat de Moffet, Young și Stuart în 1948 și ulterior modificat de Toshach și Patsula. Este compus din glicerofosfat de sodiu, tioglicolat de sodiu, clorură de calciu și agar-agar. Acesta din urmă este prezent în mediul semi-solid și absent în lichid. Unele laboratoare adaugă albastru de metilen.
Ele sunt utilizate în general atunci când nu este posibil să se semene proba imediat. În acest caz, proba este plasată în mediul de transport, în timp ce este transferată în laboratorul care va prelucra cultura..
În acest fel, se garantează că microorganismele prezente rămân vii până când sunt inoculate în mediile de cultură corespunzătoare..
Inițial, utilizarea sa a fost destinată transportului de probe uretrale sau vaginale acolo unde prezența Neisseria gonorrhoeae. Ulterior, și-au dat seama că utilitatea sa ar putea fi mai largă.
Mediul Stuart sa dovedit a fi foarte eficient în conservarea microorganismelor labile și fastidioase, cum ar fi Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertussis, printre alții. În plus față de alte microorganisme neplăcute, cum ar fi Enterobacteria.
Mediul Stuart evită practic desecarea probei, menține echilibrul osmotic și menține microorganismele la un pH ideal. Pe de altă parte, acest mediu strategic nu conține substanțe nutritive, împiedicând astfel multiplicarea microorganismelor.
Pe piață există dispozitive speciale de transport eșantion care conțin acest sau alt mijloc de transport, numit culturette. Pot fi preparate și în laborator.
Indice articol
Scopul mijloacelor de transport Stuart este de a păstra probele cât mai aproape de starea lor inițială, până când sunt procesate..
Glicerofosfatul de sodiu și clorura de calciu sunt un sistem tampon care funcționează prin menținerea pH-ului și a osmolarității..
Între timp, tioglicolatul de sodiu acționează ca un agent de reducere și, în cazul conținutului de agar, acesta îi conferă o consistență semi-solidă, pentru a întârzia oxigenarea mediului. În cele din urmă, albastrul de metilen este un indicator de oxidare, adică detectează prezența oxigenului.
Mediul semi-solid cu indicator redox este ideal pentru transportul probelor unde se suspectează prezența bacteriilor anaerobe.
Mediul Stuart, ca toate mijloacele de transport, îndeplinește anumite caracteristici, inclusiv:
-Menține tulpini microbiene viabile prezente fără să se înmulțească.
-Nu conține nutrienți; Compușii săi vizează menținerea probei hidratate, în condiții adecvate de pH și osmolaritate.
-Inhibă autolizatul unor microorganisme delicate, cum ar fi pneumococul.
-Utilizarea sa este temporară, nu trebuie prelungită prea mult.
Glicerofosfat de sodiu 10 gr
Tioglicolat de sodiu 1,0 gr
Clorură de calciu 0,1 gr
Albastru de metilen 0,002 gr
Agar-agar 3 gr
Apă distilată 1 L
Se amestecă componentele și se încălzește până se dizolvă complet. Se toarnă în tuburi sau tampoane speciale. Acestea sunt introduse în autoclavă și sterilizate la 121 ° C timp de 15 minute. Lăsați tuburile să se răcească în poziție verticală (în formă de dop). A se păstra la temperatura camerei.
Se cântăresc 14,1 g de mediu în 1 litru de apă distilată. Se încălzește amestecând frecvent până se dizolvă complet, poate fi fiert. Restul procedurii așa cum este descris deja.
Mediul deshidratat este de culoare crem și preparat trebuie să fie albastru pe suprafața sa. Acest lucru se datorează prezenței albastrului de metilen.
PH-ul mediului trebuie ajustat la 7,4 ± 0,2
Ingrediente
Glicerofosfat de sodiu 10 gr
Tioglicolat de sodiu 1 gr
Clorură de calciu dihidrat 0,1 gr
Apă distilată 1000 ml
Are aceleași ingrediente ca și semisolidul, dar nu are agar sau albastru de metilen. În acest caz, componentele sunt amestecate fără încălzire și 0,5 ml se distribuie în tuburi de 16 x 125 mm cu capace cu șurub..
Se sterilizează într-o autoclavă la 121 ° C timp de 10 minute. Pentru eșantionare, trebuie folosite tampoane de dacron dacă proba este pentru PCR sau raion dacă este pentru cultură.
Tuburile sunt depozitate la temperatura camerei.
Din punct de vedere comercial există dispozitive speciale de transport al eșantioanelor numite culturette; Acest dispozitiv este un tub alungit și subțire care are un tampon în interior și la final există un segment care conține mediul Stuart semi-solid sau lichid.
Dispozitivul este deschis și proba este prelevată cu tamponul. Se introduce apoi înapoi în tub până când vârful tamponului este introdus în mediul de transport semisolid; unii aduc un burete poliuretanic impregnat cu mediu Stuart lichid, cu care proba se păstrează păstrându-l umed.
În cazul în care se suspectează prezența unor microorganisme delicate, trebuie prelevate probe de bumbac cu cărbune..
Probele care pot fi prelevate cu tampoane sau tampoane și transferate în acest mediu sunt exudate faringiene, tampoane rectale și diverse secreții, inclusiv: vaginale, uretrale, plăgi, ochi, urechi și abces..
În timpul transferului probei în mediul de transport la laborator, trebuie evitată supunerea mediului la condiții extreme de mediu (prea rece sau prea fierbinte). De asemenea, trebuie evitate modificările bruște ale presiunii atmosferice.
Timpul în care mediul este capabil să mențină viabil un microorganism va depinde de tulpina în cauză. De exemplu, pentru microorganismele din genul Neisserias și Haemophilus, acestea pot rămâne viabile până la 24 de ore, dar tulpini precum Salmonella sau Shigella pot dura zile și chiar săptămâni..
Dacă se estimează că prelucrarea probei poate dura mai mult de 4 zile, este de preferat să congelați proba la -70 ° C.
Mijloacele de transport pregătite sau cultureta comercială trebuie să aibă o etichetă în care vor fi plasate următoarele informații:
Numele și prenumele pacientului: evita confuzia eșantionului.
Numar de identificare: este convenabil să păstrați o comandă la locul de muncă.
Sursa de colectare a probelor: ajută bacteriologul să aleagă mediile de cultură adecvate.
Medic curant: Uneori este necesar pentru posibile consultări.
Data și ora eșantionării: Este necesar pentru acceptarea sau respingerea eșantionului în funcție de timpul scurs între prelevarea eșantionului și primirea acestuia în laborator..
Alte informații care ar fi foarte utile de atașat sunt:
Diagnosticul prezumtiv: ghidează în adăugarea de medii de cultură speciale în funcție de suspiciunea de diagnostic.
Tratamentul cu antibiotice: este util să fie atașat la antibiogramă.
Toate aceste informații sunt vitale pentru a garanta buna prelucrare a eșantionului..
Pentru a evalua performanța mediului Stuart, tulpinile cunoscute pot fi inoculate și menținute la 25 ° C, cum ar fi: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.
În toate cazurile, se așteaptă recuperarea microorganismului în cauză, conservat timp de 24 de ore..
Pe de altă parte, pot fi utilizate și alte tulpini, cum ar fi: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 și Escherichia coli ATCC 11775.
În toate cazurile, se așteaptă o recuperare abundentă până la 96 de ore..
Unele studii asigură că glicerofosfatul prezent în mediul Stuart poate fi metabolizat de unele coliforme, printre alte bacterii Gram negative și, prin urmare, se poate înmulți în acest mediu..
Acest risc crește cu cât prelucrarea eșantionului este mai întârziată. La fel, expunerea mediului Stuart la temperaturi ridicate în timpul transferului său influențează acest lucru.
Nimeni nu a comentat acest articol încă.