microscop cu câmp întunecat este un instrument optic special utilizat în anumite laboratoare. Acesta este rezultatul unei modificări aduse microscopiei cu câmp luminos. Microscopia în câmp întunecat poate fi realizată prin trans-iluminare sau prin epi-iluminare.
Primul se bazează pe blocarea razelor de lumină care ajung direct în condensator, prin utilizarea dispozitivelor care se interpun înainte ca razele de lumină să ajungă în condensator..
Câmpul întunecat cu lumină transmisă face posibilă evidențierea structurilor, putând observa particule extrem de subțiri. Structurile sunt văzute cu o anumită refracție sau luminozitate pe un fundal întunecat.
În timp ce efectul epi-iluminare se realizează cu lumină incidentă sau oblică. În acest caz, microscopul trebuie să fie echipat cu un filtru special în formă de semilună..
Cu iluminarea incidentă, structurile observate se caracterizează prin prezentarea unui efect vizual în relief. Această proprietate face posibilă evidențierea marginilor particulelor suspendate.
Spre deosebire de microscopia cu câmp luminos, microscopia cu câmp întunecat este utilă în special pentru vizualizarea preparatelor proaspete care conțin particule suspendate, fără niciun fel de colorare..
Cu toate acestea, are mai multe dezavantaje, printre care nu poate fi utilizat pentru preparate uscate sau preparate colorate. Nu are o rezoluție bună. În plus, pentru a asigura o imagine bună, diafragma numerică a obiectivelor nu poate depăși cea a condensatorului..
Indice articol
Compoziția microscopului cu câmp întunecat prezintă modificări importante față de cel cu câmp luminos, deoarece fundamentele ambelor microscopii sunt opuse..
În timp ce în câmpul luminos razele de lumină sunt concentrate astfel încât să treacă direct prin eșantion, în câmpul întunecat fasciculele sunt împrăștiate astfel încât doar razele oblici să ajungă la eșantion. Acestea sunt apoi dispersate de același eșantion, transmitând imaginea către obiectiv.
Dacă ați încerca să focalizați un diapozitiv fără un eșantion, s-ar observa un cerc întunecat, deoarece fără un eșantion nu există nimic care să împrăștie lumina către obiectiv.
Pentru a obține efectul dorit în câmpul vizual, este necesar să utilizați condensatoare specifice, precum și diafragme care ajută la controlul fasciculelor de lumină..
Într-un câmp vizual întunecat, elementele sau particulele în suspensie apar strălucitoare și refractive, în timp ce restul câmpului este întunecat, făcând un contrast perfect..
Dacă se utilizează lumină oblică sau incidentă, se obține un efect de margine cu relief ridicat în structurile observate.
Este dispozitivul prin care se deplasează imaginea reflectată și mărită de obiectiv până ajunge la ocular sau oculare.
Este suportul în care se află diferitele obiective. Țintele nu sunt fixate, ele pot fi eliminate. Revolverul se poate roti în așa fel încât ținta să poată fi schimbată atunci când operatorul are nevoie de ea..
Acest șurub este folosit pentru a focaliza specimenul, se deplasează înainte sau înapoi pentru a aduce specimenul mai aproape sau mai departe de țintă și mișcarea este grotescă..
Șurubul micrometru este deplasat înainte sau înapoi pentru a muta specimenul mai aproape sau mai departe de țintă. Șurubul micrometric este utilizat pentru mișcări foarte fine sau delicate, aproape imperceptibile. El este cel care atinge accentul suprem.
Este suportul în care specimenul va sta pe lamă. Are o deschidere centrală prin care trec fasciculele de lumină. Când șuruburile macro și micrometrul sunt mișcate, scena se ridică sau coboară, în funcție de mișcarea șurubului..
Căruciorul permite parcurgerea întregului eșantion cu obiectivul. Mișcările permise sunt înainte și înapoi și invers și de la stânga la dreapta și invers.
Acestea sunt amplasate pe scenă, sunt realizate din metal și au funcția de a ține lamela pentru a preveni rostogolirea în timpul observării. Este important ca proba să rămână fixă în timp ce este observată. Elementele de fixare sunt dimensionate exact pentru a primi diapozitivul.
Brațul unește tubul cu baza. Este locul în care trebuie ținut microscopul atunci când urmează să fie mutat de pe o parte pe alta. Cu o mână iei brațul și cu cealaltă mână ții baza.
După cum sugerează și numele său, este baza sau suportul microscopului. Datorită bazei, microscopul este capabil să rămână fix și stabil pe o suprafață plană.
Au formă cilindrică. Au un obiectiv în partea de jos care mărește imaginea care provine din eșantion. Obiectivele pot fi de măriri variate. Exemplu: 4.5X (lupă), 10X, 40X și 100X (obiectiv de imersie).
Obiectivul de imersie este denumit astfel deoarece necesită plasarea a câteva picături de ulei între obiectiv și probă. Celelalte sunt numite ținte uscate.
Obiectivele sunt tipărite cu caracteristicile pe care le au.
Exemplu: marca producătorului, corectarea curburii de câmp, corectarea aberației, mărire, diafragmă numerică, proprietăți optice speciale, mediu de imersie, lungimea tubului, distanța focală, grosimea lamelei de acoperire și inelul codului Culoare.
Lentilele au un obiectiv frontal situat în partea de jos și un obiectiv spate situat în partea de sus.
Microscoapele vechi sunt monoculare, adică au un singur ocular, iar microscoapele moderne sunt binocluri, adică au două oculare..
Ocularele sunt cilindrice și de formă goală. Acestea au lentile convergente în interior, care extind imaginea virtuală creată de obiectiv..
Ocularul se alătură tubului. Acesta din urmă permite imaginii transmise de obiectiv să ajungă la ocular, ceea ce îl va mări din nou.
Ocularul din partea superioară conține un obiectiv numit ocular și în partea inferioară găzduiește un obiectiv numit colector.
Are și o diafragmă și în funcție de locul în care se află va avea un nume. Cele care se află între ambele lentile se numesc ocular Huygens și dacă este localizat după cele 2 lentile se numește ocular Ramsden. Deși există multe altele.
Mărirea ocularului variază de la 5X, 10X, 15X sau 20X, în funcție de microscop.
Operatorul poate vizualiza proba prin ocular sau oculare. Unele modele au un inel pe ocularul stâng, care este mobil și permite reglarea imaginii. Acest inel reglabil se numește inel de dioptrii.
Este sursa de iluminare și se află în partea de jos a microscopului. Lumina este halogenă și este emisă de jos în sus. În general, lampa pe care o au microscopii este de 12 V.
Diafragma microscopurilor de câmp întunecat nu are iris; în acest caz, împiedică razele care vin de la lampă să ajungă direct la eșantion, doar fasciculele oblice vor atinge specimenul. Grinzile care sunt dispersate de structurile prezente în eșantion sunt cele care vor trece la obiectiv.
Acest lucru explică de ce structurile arată strălucitoare și luminoase într-un câmp întunecat..
Condensatorul unui microscop cu câmp întunecat diferă de cel al unui câmp luminos.
Există două tipuri: condensatori de refracție și condensatori de reflexie. Acesta din urmă este împărțit la rândul său în două categorii: paraboloizi și cardioizi..
Acest tip de condensator are un disc care este interpus pentru a refracta razele de lumină, poate fi amplasat deasupra obiectivului frontal sau pe partea din spate..
Este foarte ușor să improvizați un condensator de acest tip, deoarece este suficient să plasați în fața obiectivului frontal al condensatorului un disc din carton negru care este mai mic decât obiectivul (diafragma)..
Un microscop cu lumină cu câmp luminos poate fi transformat într-un microscop cu câmp întunecat folosind acest sfat..
Sunt cele utilizate de stereomicroscopuri. Există două tipuri: paraboloizi și cardioizi..
-Este folosit pentru a investiga prezența Treponema pallidum în probe clinice.
-De asemenea, util pentru observarea Borrelias și Leptospiras.
-Este ideal pentru observarea comportamentului in vivo de celule sau microorganisme, atâta timp cât nu este necesar să se detalieze structuri specifice.
-Este ideal pentru evidențierea capsulei sau a peretelui microorganismelor.
-Microscoapele cu condensator refractiv pentru câmpul întunecat sunt mai puțin costisitoare.
-Utilizarea sa este foarte utilă la mărirea 40X.
-Sunt ideale pentru observarea probelor care au un indice de refracție similar cu mediul în care se găsesc. De exemplu, celulele din cultură, drojdie sau bacterii mobile, cum ar fi spirochete (Borrelias, Leptospiras și Treponemas).
-Poți vedea celula in vivo, ceea ce permite evaluarea comportamentului lor. De exemplu, mișcarea browniană, mișcarea prin flageli, mișcarea prin emisia de pseudopode, procesul de diviziune mitotică, eclozarea larvelor, înmugurirea drojdiilor, fagocitoza, printre altele..
-Permite evidențierea marginilor structurilor, de exemplu capsula și peretele celular.
-Particulele dezagregate pot fi analizate.
-Nu este necesară utilizarea coloranților.
-Trebuie acordată o atenție deosebită la montarea preparatelor, deoarece dacă sunt prea groase, nu vor fi bine respectate.
-Rezoluția imaginii este redusă.
-Microscoapele de câmp întunecat care utilizează condensatoare de refracție au un procent foarte mic de luminozitate.
-Pentru a îmbunătăți calitatea imaginii cu un obiectiv de imersiune (100X) este necesar să se reducă diafragma numerică a obiectivelor și, astfel, să se mărească cea a conului iluminant. Pentru aceasta, este esențial să se încorporeze o diafragmă suplimentară care poate regla diafragma numerică a obiectivului..
-Nu puteți vizualiza diapozitive uscate sau diapozitive colorate, decât dacă sunt pete vitale.
-Nu permite vizualizarea anumitor structuri, în special a celor interne.
-Microscoapele de câmp întunecat sunt mai scumpe.
Nimeni nu a comentat acest articol încă.